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武汉艾美捷科技有限公司

产品介绍

MyBioSource丨艾美捷 肠激酶抑制剂筛选试剂盒

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发布日期:2022/3/25 17:06:13

更新日期:2022/3/25 17:06:13

详细内容

 MyBioSource 艾美捷 肠激酶抑制剂筛选试剂盒--利用含有肠激酶特异性识别序列且带有AFP荧光标记的多肽底物,在肠激酶的催化作用下,该多肽底物被裂解,并释放AFC分子,继而通过测量其在Ex/Em = 380/500 nm的荧光强度,在强效肠肽酶抑制剂存在下,底物的水解会受到阻碍,荧光强度会减弱,通过荧光强度的变化,达到筛选肠激酶抑制剂的目的。

 

 

MyBioSource 艾美捷该试剂盒组成:

肠肽酶分析缓冲液20毫升

肠肽酶底物0.2ml

人肠肽酶0.17毫升

肠肽酶特异性抑制剂[抑肽酶]0.6 mM0.1 ml

 

MyBioSource 艾美捷试剂准备:

 

1.人肠肽酶:用910µl肠肽酶分析缓冲液重组,获得1mU/µl的溶液。等分保存在-80°C。避免重复冷冻/解冻。在-80°C下稳定2个月。

40 μl Enteropeptidase Assay Buffer

10 μl Enteropeptidase enzyme (1mU/µl)

 

2.筛选化合物、抑制剂对照品和空白对照品:将候选抑制剂溶解到适当的溶剂中。用肠肽酶分析缓冲液稀释至所需试验浓度的4倍。将25μl稀释试验抑制剂或分析缓冲液添加到肠肽酶孔中,作为样品筛选[S]或酶对照[EC](无抑制剂)。对于抑制剂控制,将10μl肠肽酶特异性抑制剂和15μl肠肽酶分析缓冲液添加到肠肽酶孔中。在室温下培养10-15分钟。

 

3.肠肽酶底物制备:每个孔制备25μl底物溶液。

23 µl of Enteropeptidase Assay Buffer

2 μl of Enteropeptidase Substrate

混合并向每个孔中添加25µl肠肽酶底物溶液。搅拌均匀。

 

4.测量:以动力学模式测量荧光30-60分钟(Ex/Em=380/500 nm)。在绘图的线性范围内选择两个时间点(T1T2),并获得相应的荧光值(RFU1RFU2)。

 

MyBioSource 艾美捷该试剂盒存储:

在-20°C温度下存放工具包,避免光线照射。使用将分析缓冲液加热至室温。在打开之,以低速(高速不适合酶)短暂离心小瓶子。

 

艾美捷科技是MyBioSource的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。

 

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