一、      厌氧培养箱  概述

厌氧培养箱是一种在无氧环境条件下进行细菌培养及操作的专用装置。它能提供严格的厌氧状态恒定的温度培养条件和具有一个系统化、科学化的工作区域。在本装置内操作培养，可以培养难生长的厌氧生物，又能避免以往厌氧生物在大气中操作时接触氧而死亡的危险性。因此本装置是厌氧生物检测科研的理想工具。本装置也是一物多用的良好仪器，如改变操作方式，为微需氧菌的生长繁殖提供良好的生长条件。

二、    厌氧培养箱    特点

YQX—Ⅱ/Ⅲ型 厌氧培养箱是由真空取样室、恒温厌氧操作室、气路、电路控制系统等部分组成。整机造型新颖、结构紧凑，具有厌氧环境好、密风性能好、温控精度高，稳定性好、使用方便、省气、经济、工作安全可靠等优点。其特点如下：

1.        使用科学先进手段达到厌氧环境的高精度，其恒定性能好、使用可靠；

2.        培养箱温度采用微电脑控制，能准确直观地反映箱内温度，能自动进行温度再控制，是一套有效的限温保护装置，确保培养物在安全温度环境条件下生长；

3.        箱内装有紫外线杀菌灯，可有效地避免杂菌污染；

4.        气路装置，可任意准确调节流量，能任意输入各种所需气体；

5.        气路由微电脑控制，电磁阀启动或闭合、操作灵活；

6.        操作室前窗采用厚透明特种玻璃制作，能清晰直接观察室内操作情况，操作使用塑胶手套可靠舒适、灵活、使用方便；

7.        室内装有除氧催化器。

三、   厌氧培养箱     主要技术指标

1.        取样室形成厌氧状态时间小于5分钟；

2.        操作室形成厌氧时间小于1小时（抽气充气置换）；

3.        操作室在停止补充微量混合气体的情况下，厌氧环境维持时间大于10小时；

4.        使用温度：室温+3℃~50℃；

5.        培养室温度波动≤±0.3℃；温度分布均匀性≤±1.0℃；

6.        操作室内体积：710mm×530mm×590mm（长×高×宽），

7.        电源220V±10%AC，功率：500VA

四、   厌氧培养箱      安装

1.        整机应安放在温差较小、操作方便的位置，应避免阳光直晒和远离采暖设备，放置平稳；

2.        将混合气瓶、氮气瓶安放平稳，并分别装好减压阀（含压力表），安置在适当位置；

3.        接上气路并检查气路，为防止漏气，必要时可在各接管处用密封胶粘合；

五、  厌氧培养箱      使用

（一）操作室厌氧环境形成：

1.        按使用要求放置好必要的附件和器具；

2.        通电源开照明灯，开温控仪，调节所需温度；

3.        操作室内放入1000g钯粒（封闭）和500g干燥剂，并放入美兰指示纸（封闭）；

4.        关紧取样室内外门，并抽真空校验；

5.        操作室内次置换（氮气置换）：

A.       把乳胶手套套在观察板法兰圈上并扎紧

B.       接通氮气进气路，打开氮气控制阀1，使手套鼓起，关闭阀门1，然后扎紧袋口；

6.        操作室第二次置换（氮气置换）重复一次充氮过程，取样室先抽真空，并注意随时用脚踏开关开闭排气。如此连续三次氮气置换。

7.        操作室第四次置换（混合气体置换）：

（混合气体配比为N₂  85%、H₂  10%、CO₂  5%）

A.       调换气路打开混合气阀3进气，充气时取样室先抽真空，并随时用脚踏开关开闭排气；

B.       关掉混合气体阀3，并打开阀5，使混合气体经过流量计，调整流量计，流量为每分钟10ml左右；

C.       混合气体重复2-3次转换，经过上述过程，基本形成厌氧环境。

8.        操作室内打开粑粒除氧剂，接通除氧催化器电源进行催化除氧，一小时后打开美兰指示纸观察其变色情况，不变色为操作室内达到厌氧环境；

9.        开紫外线灭菌灯，室内进行灭菌处理，灭菌时间按具体实验自定。

（二）菌种的置入和培养：

1.        检查取样室内门并关紧；

2.        打开取样室外门，将菌种放入取样室后即关上外门；

3.        取样室充氮置换三次过程：打开真空泵，先抽真空度500ml汞柱（66kPa）以上停，然后人工打开氮气阀2进气，使指针回复零位，关掉阀2。第二次重复操作一次。第三次操作时，使真空度500ml汞柱（66kPa）以上停，然后打开阀4进混合气，使指针回复零位，关掉阀4。取样室充氮置换三次过程结束；

4.        如选定真空度较低就需要增加置换的次数；

5.        取样室外门开启、关紧，再抽低真空度100ml汞柱（13kPa）检验；

6.        厌氧培养箱需要长期连续使用的条件：

A.       每天在操作室内打开美兰指示纸观察，如不正常就必须重新换气；

B.       要长期连续输入微量的混合气体，使补进的氮气能和微量的氧结合通过催化吸收，保证室内厌氧状态，补入混合气流量选定为每分钟10ml左右；

C.       连续培养运行一天，更换一次除氧剂和干燥剂。

D.       操作室内温度可任意选择和控制。

7.        混合气瓶、氮气瓶输出压力调整：调节减压阀，使输出压力0.1Mpa左右。

六、        注意事项

1.        仪器尽可能地安装于空气清净、温度变化较小的地方；

2.        开机前应全面熟悉和了解各组成配套仪器、仪表的使用说明，掌握正确使用方法；

3.        培养物放入必须是在操作室内达到绝对厌氧环境后放入；

4.        如发生故障（停气等原因）操作室内仍可保持10小时厌氧状态（超过10小时则根据需要把培养物取出另作处理）；

5.        经常注意气路有无漏气现象；

6.        调换气瓶时，注意要扎紧气管，避免流入含氧气体；

真空泵按要求使用，定期检查加油。