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ELISA试剂盒实验中各种问题的解决方案
阅读次数:195发布时间:2017/1/18 15:50:56
ELISA试剂盒试验中常会遇到这些疑问:
1. 温育条件不一致,恒温箱温育较水浴显色深,OD值高出0.1-0.15,均选用恒温箱。如用水浴水温应控制在37℃。
2. 样品数量不一,加样时间长短不一。当重复某一样品时,加样时间尽可能与初次挨近。
考虑到有些客户没有试验设备,我公司还可以供应代测效力,只需付试剂盒的费用,代测是免费的哦!
间接法 :此测定办法与直接法相似,不一样在于一级抗体没有酶符号,改用酶符号的二级抗体去辨识一级抗体来测定抗原量。
双抗体夹心法 :被查看的抗原包被在两个抗体之间,其间一个抗体将抗原固定于固相载体上,即捕捉抗体。
ELISA试剂盒另一个则是查看抗体,此抗体可用酶符号后直接测定抗原的量;或不符号,再透过酶符号的二级抗体来测定抗原的量。
这两种抗体有必要留神选择,才可防止交互反应或比赛一样的抗原联络部位。
比赛法:样本里的抗原(清闲抗原)和纯化并固定在固相载体上的抗原(固定抗原)一起比赛一样的抗体,当样品里的清闲抗原越多,就可以联络越多的抗体,而固定抗原就只能联络到较少的抗体,反之亦然。
经清洁进程,洗去清闲抗原和抗体的复合物,只留下固定抗原和抗体的复合物,拿来与只需固定抗原的对照组作用相比较,依据呈色区别就可计算出样品里的抗原含量。
ELISA试剂盒直接法 :将抗原直接固定在固相载体上,参与酶符号的一级抗体,即可测定抗原总量,此一级抗体的特异性非常重要。
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