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ELISA试剂盒检验方法详解

阅读次数:138发布时间:2017/9/27 9:11:06

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ELISA试剂盒检验方法详解:

1)使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。

2)取所需用量酶标板条,设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,28℃保存。

3)空白对照孔加样品稀释液100μl,阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl,样品孔每孔加入稀释后的样品100μl

4)混匀,置37℃反应30分钟。

5)扣去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次,拍干。

6)每孔加酶标记物100μl(空白孔除外),置37℃反应30分钟。

7)洗涤,同步骤5

8)每孔依次加底物液A、底物液B50μl,混匀,37℃避光反应10分钟。

9)每孔加终止液50μl,混匀,用空白孔调零,于450nm(可用630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A值)。


ELISA试剂盒
实验加样须注意如下问题:

1吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确

2不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确

3正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:

1角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确

2吸头应当贴着管壁和液面的交界处。


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