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实验新手自己讲解elisa试剂盒流程

阅读次数：343发布时间：2017/10/26 10:35:52

注意事项：

1.如果一次只做一部分孔，贴膜可以剪刀剪开，只用一部分。保证膜可以把加液后的孔盖住就可以。

2.加样时候，一定要保证每孔加样量完全一样。避免因为操作原因，每孔液体量有区别。ELISA比较敏感，操作误差会导致*后读数有不小的差别。

3.加的样，elisa试剂盒保证样品加在孔底，不要粘在管壁上，减少孔与孔之间的差异。

第二天早上，来洗掉包被液。

注意事项：

1. ELISA用的所有液体系统，记得一定要预先调PH值到7.2-7.4之间，按照说明书都无菌过滤过。1XPBS的PH值在7.68左右，仍然需要加盐酸调酸一点。Trizma base配出来，PH在9.98,必须调PH!否则ELISA中抗原抗体根本不能正常结合。蛋白对于PH值极度敏感。

2. elisa试剂盒无菌要求多高，现在不知道。建议无菌配好的液体放在4度冰箱保存。每次用之前，放在室温下至少15分钟。ELISA用的液体，室温的温度，效果比较好。

洗包被液的时候，直接把板子翻过来，弃掉液体。在厚厚的吸水纸上，用力拍打板子，力求把孔中的液体完全弃干净。

用WASH BUFFER洗涤三次。因为孔的容量是400UL,但是300UL基本就可以把孔覆盖满。所以，建议洗板子的时候，每孔加350ul左右。

注意事项：

1.每次洗涤的时候，尽量拍干孔中液体。这样洗涤得比较干净。

2. 孔中没有液体时候，动作一定要快！！！ELISA包被后的孔，绝对不能干掉！否则非常影响结果。

3.封闭。

1.用是1%BSA in 1XPBS. 无菌过滤，elisa试剂盒4度保存，用之前放在室温复温。

2.封闭液可以封闭全孔，所以每孔加300UL封闭液，室温1小时。