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试剂盒保温的最正确方法

阅读次数：222发布时间：2017/11/1 10:14:16

1.在ELISA试剂盒中一般有两次抗原抗体反响，即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反响的完

成需求有必定的温度和时刻，这一保温进程称为温育(incubation)，有人称之为孵育，在

ELISA中似不恰当。

2.　ELISA属固相免疫测定，抗原、抗体的结合只在固相表面上发作。以抗体包被的夹心

法为例，参加板孔中的标本，其间的抗原并不是都有平等的和固相抗结合的时机，只需

靠近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐步平衡的进程，因而需经分散

才干到达反响的终点。在这以后参加的酶标记抗体与固相抗原的结合也相同如此。这就是为

什么ELISA反响总是需求必定时刻的温育。

　　3.温育常选用的温度有43℃、37℃、室温文4℃（冰箱温度）等。37℃是实验室中常用

的保温温度，也是大多数抗原抗体结合的适宜温度。在树立ELISA方法作反响动力学研究

时，实验标明，两次抗原抗体反响一般在37℃经1-2小时，产品的生成可达高峰。为加快

反响，可进步反响的温度，有些实验在43℃进行，但不宜选用更高的温度。抗原抗体反响

4℃更为完全，在放射免疫测定中多使反响在冰箱中过夜，以构成多的沉积。但因所需

时刻太长，在ELISA中一般不予选用。

　　4.保温的方法除有的ELISA试剂盒仪器附有特制的电热块外，一般均选用水浴，可将ELISA板

置于水浴箱中，ELISA板底应贴着水面，使温度敏捷平衡。为避免蒸发，板上应加盖，也

可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔，此刻可让反响板漂浮在水面上。若用保温箱，ELISA

板应放在湿盒内，湿盒要选用传热性杰出的资料如金属等，在盒底垫湿的纱布，后将

ELISA板放在湿纱布上。湿盒应先放在保温箱中预温至规则的温度，特别是在气温较低的

时分更应如此。无论是水浴还是湿盒温育，反响板均不宜叠放，以确保各板的温度都能迅

速平衡。室温温育的反响，操作时的室温应严格约束在规则的范围内，标准室温温度是指

20-25℃，但具体操作时可根据说明书的要求操控温育。室温温育时，ELISA板只需平置

于操作台上即可。应留意温育的温度和时刻应按规则力求精确。为确保这一点，一个人操

作时，一次不宜多于两块板一起测定。