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过表达干扰慢病毒包装服务
阅读次数:608发布时间:2018/1/17 14:37:58
慢病毒具有广泛的感染谱,可以有效感染分裂期和静止期的细胞,并且能够长期稳定表达外源基因,因而成为导入外源基因的有力工具。现在慢病毒系统已经被广泛应用到各种细胞系的基因过表达、基因干扰以及活体动物实验中。
服务内容:慢病毒包装的基因涉及常规的蛋白编码基因及非编码基因,比如:miRNA、lncRNA以及circularRNA等的过表达及干扰的慢病毒包装服务。
慢病毒包装服务价格与周期
服务编号 | 病毒滴度 | 规格 | 赠送阴性对照 | 价格 | 周期 |
LC1033 | 过表达慢病毒 | 过表达慢病毒,病毒滴度>10^8PFU/ml | 1ml(>10^8PFU/ml) | 询价 | 6-8周 |
LC1034 | 干扰慢病毒 | 过表达慢病毒,病毒滴度>10^8PFU/ml | 1ml(>10^8PFU/ml) | 询价 | 6-8周 |
慢病毒包装服务实验流程
a. 慢病毒过表达质粒载体的构建: 根据目的基因序列设计特异性扩增引物,采用高保真PCR技术从模板中调取目的基因CDS区连入核心载体。
b. 慢病毒干扰质粒载体的构建:合成目的基因的siRNA序列,退火成双链,然后连入慢病毒干扰质粒载体。
c. 非编码基因过载体构建:从模板中调取基因相应的miRNA前体, 然后连入慢病毒核心质粒(miRNA以基因组为模板,lncRNA和circularRNA根据需要可以用cDNA或基因组为模板)。
d. 慢病毒载体的包装与浓缩纯化: 核心质粒和辅助质粒进行高纯度无内毒素抽提,共转染293T细胞,转染后8h 更换为完全培养基,培养48和72h后,分别收集富含慢病毒颗粒的细胞上清,病毒上清液通过超离心浓缩病毒。
服务流程:
徕创客户须知
1、适用于在难以转染的细胞中进行的基因过表达或干扰研究,如原代神经细胞,干细胞,肿瘤细胞等;
2、适用于快速建立稳定表达的特定基因细胞株;
3、适用于In vivo 实验,包括稳定表达细胞株成瘤实验、局部注射、活体动物的基因过表达或干扰等。
徕创生物服务承诺
提供完整客观准确的实验报告。
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