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上海远慕:免疫细胞治疗

阅读次数：358发布时间：2019/7/1 10:40:23

背景

细胞疗法无疑是引领生物医学未来的新希望，但人类细胞在医学中的应用并不是一个新概念。在过去的几十年里，细胞疗法取得了长足的进步，细胞治疗本身不再是一个简单的细胞收集和回灌。现在通常需要对细胞 Countstar产品已被国内外许多领xian细胞治疗的公司所接受，我们可以帮助我们的客户建立一个稳定可靠的细胞浓度活率监测系统。

细胞浓度和活率检测中面临的挑战
A0/PI双荧光法浓度活率检测
T/NK 细胞介导的细胞毒性
检测结果一致性
Countstar产品-合规性

细胞浓度和活率检测中面临的挑战

在临床CAR-T细胞制造的每个环节中，必须精确确定细胞活率和细胞浓度。新鲜分离的原代细胞或培养细胞可能含有杂质，几种细胞类型或干扰颗粒如细胞碎片，这将使得不可能分析目标的细胞。

A0/PI双荧光法浓度活率检测

碘化丙啶是可以和细胞核核酸结合的荧光染料。AO可以穿透活细胞和死细胞对细胞核进行染色并发出绿色荧光，PI进入死细胞对细胞和进行染色并发出红色荧光。因此AO/PI为细胞核染料，可以准确区分活细胞与死细胞，而且可以排除杂质或者非特异细胞的干扰，进行精准的浓度活率检测。

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T/NK 细胞介导的细胞毒性

对靶标细胞用无毒的无放射性的钙黄绿素进行标记（或者GFP转染标记），我们可以观察CAR-T细胞对肿瘤细胞杀伤效应。活的肿瘤细胞会含有钙黄绿素或者GFP，死的肿瘤细胞不含有钙黄绿素或者GFP。Hoechst33342被用来染色所有的细胞（包含T细胞和肿瘤细胞），PI用来染色所有的死细胞（包含T细胞和肿瘤细胞）。这种染色策略可以让我们对细胞进行精准的区分。