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上海远慕生物科技有限公司

产品介绍

葡聚糖凝胶LH-20层析原理

价 格:¥电议

型 号:

产品完善度:

生产地:其他访问量:51次

发布日期:2017/11/28 10:06:10

更新日期:2019/11/22 17:01:48

详细内容

 上海远慕生物详细为您介绍葡聚糖凝胶LH-20层析原理,产品特点,实验流程,注意事项,规格等详情,本司促销季在即,欢迎来电咨询!远慕生物作为一家专业从事科研试剂的老牌商家,长期现货为客户提供进口品牌及国产品牌的ELISA试剂盒,培养基,抗体,抗原,动物血清血浆,标准品对照品,氨基酸,蛋白质,细胞培养,液体,环保试剂,有机试剂,无机试剂,抗生素,维生素,生化试剂,生物试剂,化学试剂,染色液,溶液,缓冲液,实验耗材,其他实验试剂等,提供全程实验操作指导,了解更多试剂详情请来电!



葡聚糖凝胶LH-20层析原理产品简介:

中文名:葡聚糖凝胶LH-20

英文名:Sephadex LH-20 

供应商:上海远慕

规格:25g,100g,500g

工作Ph:2-11

球蛋白分离范围:100-4000

操作温度:4-40度

保存条件:4-25度

基质:交联葡聚糖

排阻极限:4-5kd(与所用溶剂有关)

性状:多孔,白色微球

葡聚糖凝胶 LH-20分离原理: 

 1.葡聚糖凝胶 LH-20的分离原理主要有两方面:以凝胶过滤作用为主,兼具反相分配的作用(在反相溶剂中)。因为凝胶过滤作用,所以大分子的化合物保留弱,先被洗脱下来,小分子的化合物保留强,后出柱。  

2.如果使用反相溶剂洗脱, Sephadex LH-20对化合物还起反相分配的作用,所以极性大的化合物保留弱,先被洗脱下来,极性小的化合物保留强,后出柱。  如果使用正相溶剂洗脱,这主要靠凝胶过滤作用来分离。


 

葡聚糖凝胶 LH-20产品用途:
 
1.葡聚糖凝胶LH-20可以在水中应用;

2.可以用于含有机溶剂的溶液中,而葡聚糖凝胶G25只能用于水中。
 
3.葡聚糖凝胶LH-20除有葡聚糖凝胶G25的分子筛作用外,还有反相色谱的作用。




葡聚糖凝胶 LH-20说明:

ephadex LH-20适合用于有机溶剂分离嗜脂性分子,天然产物在有机溶剂中的纯化。可以非常经济的大规模制备各种天然产物,尤其在中药有效成分提取中作为大孔吸附树脂解析物的纯化。  

结合凝胶过滤﹑分配色谱及吸附层析于一身,能分离结构相近的分子。因此使用中要考略几种色谱的作用机制。   载量可达250mg样品/ml凝胶﹑极少需要再生﹑使用得当,分离效果可保持不变。

上样量视被分离物的结构性能的差异而定:差异大,则大;差异小,则小。凝胶过滤的上样量一般为5-7%的床体积,我们建议初次上样量控制在1-2%的床体积,视分离情况可以逐步增加;柱高的选择也与分离要求相关――难分物质要有一定柱高和流速控制;流动相可参考TLC的条件,正确的流动相可以提高分离度并缩短分离时间。



 
葡聚糖凝胶LH-20层析原理

1. 凝胶过滤:依赖于分子的大小和形状。

2. 吸附层析:依赖于被分离化合物与凝胶之间的氢键作用。          

3. 分配层析:依赖于被分离化合物在流动相(溶剂)和固定相(凝胶)之间的分配,这主要由样品的极性和溶剂的极性决定的。




葡聚糖凝胶LH-20产品特点:

1. 适合用有机溶剂分离嗜脂性分子,可以非常经济地大规模制备各种天然产物。

2. 结合凝胶过滤,分配色谱及吸附性层析于一身,分离结构非常相近的分子。

3. 载量可高达300mg样品/ml凝胶,极少需要再生,分离效果可保持十几年不变。




葡聚糖凝胶LH-20操作流程:

1.选择条件:  梯度洗脱在葡聚糖凝胶 LH-20使用中并不象在正相柱层析中那么重要。首先你的样品须要能溶解在尽量少量的洗脱剂中。极性大的用甲醇水系统;极性小者一般用不含水的系统。我们实验室常用正己烷二氯甲烷甲醇系统,用了很多年,效果较好。

2.饱和层析柱:用洗脱剂将凝胶摇匀,直立柱身,让其自然沉降,此时要防止气泡留在其中。至少半小时打开开关,流出几个柱体种的洗脱剂,目的是使其膨胀在正确比例的洗脱剂中。  

3. 样品处理:用尽量少的洗脱剂溶解样品,常压过滤。

4.湿法上柱。这也是要有技巧的步骤。  

5.洗脱:控制流速,一般1drop/s以下,可参见厂家的一些参数;必要时更改极性(很多时一个极性就可以将样品洗脱完毕)。再生以备下次使用。




葡聚糖凝胶LH-20分离技巧

1.分离时流速不可太快,切切不可心急,所谓欲速则不达;接馏分时可开全速,节省时间。

2.柱子尽可能长,葡聚糖凝胶LH-20柱长的增加将极大地改善分离,所不要吝惜填料,宁可将填料全装在一根大柱子中,不要将填料装成几根小柱。所谓集中优势兵力,打击敌人。

3.馏分一定要接的细,可1/10,或1/20 个保留体积接成一馏分。

4.洗脱体积一般为2-3个保留体积,对特殊保留强的化合物,可洗脱5个保留体积。
 
5.葡聚糖凝胶LH-20对黄酮类成分的分离效果极佳,方法很成型,有大量文献参考。

6.填料反复使用,每次用完,一般可用甲醇将柱子洗干净,然后用下一次分离的起步溶剂将甲醇替换出来,待用。暂时不用试可以水洗→含水醇洗(醇的浓度逐步递增)→醇洗,后泡在醇中贮于磨口瓶中备用。如长期不用时,可在以上处理基础上,减压抽干,再用少量乙迷洗净抽干,室温充分挥散至无醚味后,60~80°C干燥后保存。




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