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上海远慕生物科技有限公司

产品介绍

戊二醛固定液(2.5%,电镜专用)配制说明

价 格:¥电议

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产品完善度:

生产地:其他访问量:94次

发布日期:2017/12/8 14:14:50

更新日期:2019/11/22 9:41:55

详细内容

戊二醛固定液(2.5%,电镜专用)配制说明 产品简介


中文名:戊二醛固定液(2.5%,电镜专用)

供应商:上海远慕
规格:100ml,500ml
分类:固定液
保存:4℃,避光,12个月
产品用途:对细胞核、细胞浆的细微结构固定效果好,主要用于电镜标本的固定。不适用固定核酸、多糖物质。
说明:进口原料,主要由戊二醛、磷酸盐组成,特别适用于电镜样本。
适用范围:限于科研,实验
戊二醛固定液(2.5%,电镜专用)配制说明
戊二醛固定液(2.5%,电镜专用)简介
固定液主要分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味酸盐类固定液等,较为常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。戊二醛固定液会引起蛋白质α-螺旋结构变形,不利于过氧化物酶染色。戊二醛固定液固定速度快,渗透力差。Leagene戊二醛固定液(电镜专用,2.5%)由戊二醛、磷酸盐、去离子水等组成,pH7.2~7.4,该固定液对细胞核、细胞浆的细微结构固定效果好,经常用于电镜标本的固定。




戊二醛固定液(2.5%,电镜专用) 操作流程
1、根据实验具体要求操作。
2、取新鲜标本,立即入戊二醛固定液4℃固定1~4h。
3、稍大标本应适当延长固定时间。
4、送检或4℃保存。



戊二醛固定液(2.5%,电镜专用)配制说明
1.离心收集细胞,PBS漂洗两遍,双醛固定(2%多聚甲醛+2.5%戊二醛。双醛固定对免疫电镜更加适合。)30min,PBS漂洗两遍,1%锇酸固定1h,PBS清洗3遍,用小的样品勺取出一点标本,置包埋板或小的离心管中,然后常规梯度脱水,浸透,包埋。

2.把细胞离心取沉淀细胞,,然后拿PBS液漂洗两遍后,倒去上清,直接加2.5%戊二醛固定后,电镜室脱水、包埋、切片后置透射电镜下观察。


戊二醛固定液(2.5%,电镜专用)配制说明
注意事项
1、 戊二醛固定液有一定腐蚀性,请在通风较好的环境下小心操作, 避免吸入。
2、 组织取材的厚度不同,固定时间也不同。常规活检组织比较适合的厚度为2~4mm,一般不超过6mm。对组织恰当的选材有利于固定液的渗透。
3、 固定液的容量应足够,一般固定液与组织块的体积比率应大于10:1。如果容积不够大,可以在固定期间更换1~3次固定液。
4、 温度对固定的影响很明显,提高温度可以加速固定作用,但本固定液不要提高温度。
5、 取出新鲜组织后,应及时固定。无法及时固定时,应保存于格理盐水中及时送检。
6、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


固定液分类

Ⅰ类:醛类,甲醛,戊二醛,多聚甲醛,,已二醛,丙二醛等。
Ⅱ类:氧化剂类,四氧化锇(奥酸),高锰酸钾,重铬酸钾等。
Ⅲ类:蛋白变性类,甲醇,乙醇,醋酸等。
Ⅳ类:其他,氯化汞,苦味酸等。


戊二醛固定液(2.5%,电镜专用)固定液的要求

1、挥发性小,操作温度下有较低蒸气压,以免流失。
2、热稳定性好,操作温度下不发生分解和聚合反应,并且液体状态,保持固定液原来的特性。
3、对试样有一定的溶解能力,以免被测组分被带走起不到分配作用。
4、具有良好的选择性,即操作条件下,对沸点相近或者性质相似的不同物质有尽可能高的分离能力。
5、化学稳定性好,不与被测组分,担体,载气发生化学反应。



戊二醛固定液(2.5%,电镜专用)配制说明固定液的选择
一般采取相似相溶原则:
1、分离非极性物质时,选用非极性固定液,非极性大的后出峰,小的先出峰
2、分离极性物质时,选用极性固定液,极性大的后流出,小的先流出
3、极性与非极性混合液时,选择极性固定液,极性大的后出峰,小的先出峰
4、对于氢键型的物质,选择极性或者氢键型固定液,不易形成氢键的先流出色谱柱,反之则反
5、分离复杂的难分离物质,可选用两种或两种以上的混合固定液。



戊二醛固定液(2.5%,电镜专用)配制方法
1.先以500ml左右的二甲酸钠缓冲液溶解对苯醌及多聚甲醛,然后加入戊二醛,后加入二甲酸钠缓冲液至1000ml充分混合。

2.对苯醌与戊二醛及甲醛联合应用,即可阻止醛基对抗原的损害,又不影响超微结构的保存,故适于多种类抗原的免疫细胞化学,尤其是免疫电镜的研究。


戊二醛固定液(2.5%,电镜专用)相关产品如下
多聚甲醛-戊二醛混合固定液(4%/1%)
多聚甲醛溶液(4% PFA,RNase free)
中性福尔马林固定液(10%,RNase free)
甲醛钙固定液(10%)
Millonig缓冲福尔马林(10%)
福尔马林-乙酸钙固定液(10%)
多聚甲醛溶液(4% PFA,电镜专用)
酒精-福尔马林-甘油固定液
乙醇-福尔马林-醋酸固定液
乙醇-福尔马林-醋酸固定液
多聚甲醛溶液(6% PFA)
多聚甲醛-蔗糖溶液(5%)
戊二醛固定液(1%,电镜专用)
多聚甲醛溶液(4% PFA)
Carnoy固定液Ⅱ
Hollande固定液
一氧化氮合酶染色液
FPA固定液
Bouin's固定液
磷酸缓冲盐粉剂(1×PBS,含钙镁)细胞松弛素B储存液(Cytochalasin B,1mg/ml)高盐TE缓冲液(1mol/L,pH8.0)
胰蛋白酶-CaCl2溶液(0.1%)
GTBE电泳缓冲液(10×)

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