产品介绍
猪胰高血糖素样肽1(GLP-1)试剂盒(ELISA)@新闻新闻资讯
价 格:¥1
型 号:48T 96T
产品完善度:
生产地:其他访问量:0次
发布日期:2019/10/29 10:49:38
更新日期:2019/10/30 14:55:41
详细内容
实验原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被猪胰高血糖素样
肽1(GLP-1)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温
育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转
化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的猪胰高血糖素样肽1(GLP-1)呈正相关。用酶标仪
在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
样本处理及要求
1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20
分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×
g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞
会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体
积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。
推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织
细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取
上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置
于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
滁州仕诺达生物科技有限公司
公司主营产品:ELISA 试剂盒,标准品,试剂,染色液,动物血制品,也可代理8进口品牌,还有代8 测服务 欢迎致电咨询 18175256626 18256960116
需要而未提供的试剂和器材
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
4. 蒸馏水或去离子水
试剂盒组成
名称 96 孔配置 48 孔配置 备注
微孔酶标板 8 孔×12 条 8 孔×6 条 无
标准品 0.3mL*6 管 0.3mL*6 管 无
样本稀释液 6mL 3mL 无
检测抗体-HRP 10mL 5mL 无
20×洗涤缓冲液 25mL 15mL 按说明书进行稀释
底物 A 6mL 3mL 无
底物 B 6mL 3mL 无
终止液 6mL 3mL 无
封板膜 2 张 2 张 无
说明书 1 份 1 份 无
自封袋 1 个 1 个 无
备注:
1. 标准品浓度依次为:16、8、4、2、1、0.5 pmol/L
2. 经过大量正常标本检验,标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内,实验过程中
直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过标准品浓度时,可用样本稀释液将标本
进行适当稀释后再进行实验。
注意事项
1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室
温 20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中
不要让微孔干燥掉。
3. 消除板底残留的液体和手指印,否则影响 OD 值。
4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。 猪胰高血糖素样肽1(GLP-1)试剂盒(ELISA)@新闻新闻资讯
5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6. 在储存和温育时避免强光直接照射。
7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏
滁州仕诺达生物科技有限公司
公司主营产品:ELISA 试剂盒,标准品,试剂,染色液,动物血制品,也可代理9进口品牌,还有代9 测服务 欢迎致电咨询 18175256626 18256960116
试剂盒中反应试剂的生物活性。
9. 不能使用过期产品。
10. 如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
试剂准备
试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
操作步骤
1. 从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回 4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL;
3. 样本孔中加入待测样本 50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体 100μL,
用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置 1min,甩去洗涤液,吸水纸
上拍干,如此重复洗板 5 次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。
7. 每孔加入终止液 50μL,15min 内,在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。
实验结果计算
以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘
制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。
试剂盒性能
1. 检测范围:0.5 pmol/L – 16 pmol/L。 猪胰高血糖素样肽1(GLP-1)试剂盒(ELISA)@新闻新闻资讯
2. 灵敏度:检测浓度小于 0.1 pmol/L。
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于 15% 猪胰高血糖素样肽1(GLP-1)试剂盒(ELISA)@新闻新闻资讯
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被猪胰高血糖素样
肽1(GLP-1)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温
育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转
化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的猪胰高血糖素样肽1(GLP-1)呈正相关。用酶标仪
在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
样本处理及要求
1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20
分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×
g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞
会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体
积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。
推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织
细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取
上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置
于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
滁州仕诺达生物科技有限公司
公司主营产品:ELISA 试剂盒,标准品,试剂,染色液,动物血制品,也可代理8进口品牌,还有代8 测服务 欢迎致电咨询 18175256626 18256960116
需要而未提供的试剂和器材
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
4. 蒸馏水或去离子水
试剂盒组成
名称 96 孔配置 48 孔配置 备注
微孔酶标板 8 孔×12 条 8 孔×6 条 无
标准品 0.3mL*6 管 0.3mL*6 管 无
样本稀释液 6mL 3mL 无
检测抗体-HRP 10mL 5mL 无
20×洗涤缓冲液 25mL 15mL 按说明书进行稀释
底物 A 6mL 3mL 无
底物 B 6mL 3mL 无
终止液 6mL 3mL 无
封板膜 2 张 2 张 无
说明书 1 份 1 份 无
自封袋 1 个 1 个 无
备注:
1. 标准品浓度依次为:16、8、4、2、1、0.5 pmol/L
2. 经过大量正常标本检验,标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内,实验过程中
直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过标准品浓度时,可用样本稀释液将标本
进行适当稀释后再进行实验。
注意事项
1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室
温 20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中
不要让微孔干燥掉。
3. 消除板底残留的液体和手指印,否则影响 OD 值。
4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。 猪胰高血糖素样肽1(GLP-1)试剂盒(ELISA)@新闻新闻资讯
5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6. 在储存和温育时避免强光直接照射。
7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏
滁州仕诺达生物科技有限公司
公司主营产品:ELISA 试剂盒,标准品,试剂,染色液,动物血制品,也可代理9进口品牌,还有代9 测服务 欢迎致电咨询 18175256626 18256960116
试剂盒中反应试剂的生物活性。
9. 不能使用过期产品。
10. 如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
试剂准备
试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
操作步骤
1. 从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回 4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL;
3. 样本孔中加入待测样本 50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体 100μL,
用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置 1min,甩去洗涤液,吸水纸
上拍干,如此重复洗板 5 次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。
7. 每孔加入终止液 50μL,15min 内,在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。
实验结果计算
以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘
制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。
试剂盒性能
1. 检测范围:0.5 pmol/L – 16 pmol/L。 猪胰高血糖素样肽1(GLP-1)试剂盒(ELISA)@新闻新闻资讯
2. 灵敏度:检测浓度小于 0.1 pmol/L。
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于 15% 猪胰高血糖素样肽1(GLP-1)试剂盒(ELISA)@新闻新闻资讯