革兰氏阳性菌细胞壁结构致密，肽聚糖层厚，脂质含量少，结晶紫及媒染剂进入细胞内，形成结晶紫—碘复合物。脱色过程中，虽然溶解细胞壁脂质成分形成小孔。但脱水作用使细胞壁收缩又构成屏障，阻止结晶紫—碘复合物被乙醇溶出，细菌保持紫色。革兰氏阴性菌细胞壁疏松，肽聚糖层较薄，脂质含量高，乙醇溶解脂质，细胞壁通透性增高，结晶紫—碘复合物溶出，使细菌脱色，经复染细菌呈红色。

 

配方：

1.       结晶紫染色液：

结晶紫           1g

95%乙醇          20ml

1%草酸铵水溶液   80ml

 

2.       革兰氏碘液：

碘               1g

碘化钾           2g

蒸馏水           300ml

3.       95%酒精：

 

4.       沙黄复染液

沙黄             0.25g

95%乙醇          10ml

蒸馏水           90ml

 

使用说明：

1．  将涂片在火焰上固定，滴加结晶紫染色液，染1min，水洗。

2．  滴加革兰氏碘液，作用1min，水洗。

3．  滴加脱色酒精，约30s;或将脱色酒精滴满整个涂片，立即倾去，再用脱色酒精滴满整个涂片，脱色10s。

4．  水洗，滴加沙黄复染液，复染1min。水洗，待干，镜检。

 

结果判断：

 

贮存条件：常温 ，避光贮存。