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精子计数板猪人工授精

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发布日期：2011/1/11 17:28:36

更新日期：2012/1/27 11:15:15

详细内容

医学用，精子计数板

材料：优质玻璃无划痕
可根据客户要求制作各种规格的玻片.

应用：手工血液学检验；红细胞、白细胞、血小板、嗜酸细胞计数；精子分析；脊髓液/体液细胞计数。

精子的浓度可用血球计数板法进行测定：轻轻摇动精液，用微量移液器（取样器）取精液100微升，擦去外部精液，加入一次性试管中，用移液管吸取3%氯化钠溶液3.9毫升（即3900微升）加入精液中，混合均匀，原精液被稀释了40倍。

取样稀释原精液

将血球计数板放在载物台上，加盖盖玻片，用取样器吸取25微升稀释后精液加入计数板与盖玻片之间的计算室中使计算室充满（见图）。

将稀释后的精液注入计数室中

放在显微镜下找到计算室，计数计算室内的总精子数，为了减少计数的工作量，可选择有代表性的五个中方格，如四角一中心，或斜对角线的五个方格（见图用红色框标记的中方格）计数精子。

计数室的五个中方格

为了避免计数精子时重复，应以精子的头数为准，对在格线上的精子，可依照数上不数下，数左不数右的原则，计数五个中方格中的总精子数。为计算室的一个中方格，在计数量，在右侧线和下端上的精子（为了识别，标记为白色）是不应进行计数的精子。

一个中方格的精子（白色为不计数精子）

五个中方格总精子计数完后得出的结果，依下列公式进行计算原精子密度（此公式已被简化）：

精子密度（亿个/毫升）=五个中方格总精子数×0.02

血球计数板法是其它光学测定方法的基础，因为光学的度数是根据光学仪器的原理得出的，与精子密度并没有直接关系，必须有已知的密度值才能获得对照表。

活力是精液中前进运动的精子所占总精子数的百分比。

对精子活力评定，通常只能作估测，所以需要有一定经验的技术人员进行评定。显微镜的恒温载物台应在活力检查前预热到37～39℃，并把血球计数板（或者载玻片）、盖玻片一起预热。用移液器取10或15ul精液（注意移液器的吸嘴是一次性的，并用消毒纸巾擦净，再取样，以防污染精液），注在预热后的血球计数板（或者载玻片）中间。并盖上盖玻片。盖盖玻片的方法是，先将盖玻片放在精液滴的左侧与载玻片形成一个角度，呈一个锐角，并向右移动盖玻片，盖玻片与精液接触时，再将盖玻片放下，这样可避免产生气泡，影响检查结果。盖上盖玻片可以在显微镜视野里看到一薄层的精子，视野清晰，避免因不同层精子的活力不同而使判断出现人为误差。

用640倍或1600倍的显微镜来检测精子的活力，即判断视野中前进运动精子所占的比例。

活力5级评分方法是：

整个视野中有明显的大的运动波很好 5分

出现一些运动波和精子成群运动好 4分

出现成群运动较好 3分

无成群运动，部分呈前进运动一般 2分

只有蠕动差 1分

无精子活动 0分

注：运动波是指精子成群运动时，推动液体运动形成的云雾状翻滚现象。

对稀释保存的精液，在进行精子活力评估时，一般采用十级制评分。即估测视野中前进运动精子的百分率，因为，稀释后的精液，精子的运动较容易看清，可根据前进运动精子和非前进运动精子的大致比例，来进行估计。例如，有70%的精子呈前进运动，则活力为0.7，以此类推。

不论是原精液还是稀释保存的精液，如果在检查中精子的活力很差，应仔细检查每个环节，进行第二次检查，应注意移液器、血球计数板（载玻片）和盖玻片必须洁净，对精子无毒害，血球计数板（载玻片）温度适宜。如果第二次检查仍很差，则精液必须废弃。