产品介绍
赭曲霉毒素检测试剂盒
价 格:¥电议
型 号:
产品完善度:
生产地:其他访问量:293次
发布日期:2009/11/2 0:00:00
更新日期:1900/1/1 0:00:00
详细内容
赭曲霉毒素检测试剂盒
适用
Beacon赭曲霉检测试剂盒利用竞争酶联免疫吸附原理定量检测赭曲霉毒素
检测原理
Beacon赭曲霉检测试剂盒是基于竞争性酶联免疫吸附检测法。用甲醇水震荡萃取粉碎样品中的赭曲霉毒素,过滤萃取物,然后进行免疫学检测。加入赭曲霉的酶标记物到已加有标准或样品的测试孔中,抗体被加入后反应开始,样品及酶标记物竞争结合连接在微孔上的抗体,10分钟培养后,倒掉孔中的溶液,洗掉微孔中未的结合赭曲霉毒素和酶标记物。加入无色的底物溶液,培养10分钟,所有结合的酶标记物使底物转化成蓝色物质。加入停止液然后读取吸光度值,未知浓度样品与标准吸光度值进行比较,就可以得到样品的赭曲霉毒素浓度。
特异性
Beacon赭曲霉毒素检测试剂盒对于赭曲霉毒素有很强的特异性。标准品设为赭曲霉A, 与赭曲霉B的交叉反应率为9.3%。
试剂及材料
若试剂盒保存在2-8℃,未拆开包装的试剂盒在标识的保质期之前均可放心使用。
1.真空包装,包含干燥剂的8×12的微孔板。
2.5瓶2ml浓度为0,3.0,6.0,18,40ng/ml(ppb)的赭曲霉标准品,(注意:因为谷物样品在萃取过程中1:5稀释,标准品实际上为设定标准浓度的1/5,原始样品的浓度无需换算。)
3.1瓶10ml的酶标记物。
4.1瓶10ml的鼠抗赭曲霉抗体。
5.1瓶14ml的底物溶液
6.1瓶14ml的停止液(注意:1N 盐酸,小心操作!)
7.1瓶50ml的20倍浓缩清洗浓缩液
8.操作说明书
注意事项
1.每种试剂适用于Beacon 赭曲霉毒素试剂盒。其他生产商的试剂不可替代本试剂盒中的任何试剂,不同批次之间的试剂不可混用。
2.试剂的稀释及污染以及程序中未提及的样品,均会导致结果失真。
3.不可使用过期试剂。
4.开始实验前试剂回温到室温(20-28℃),避免试剂在室温存放过久(>24小时)。
5.赭曲霉为极毒物质,将所有丢弃的液体倒入盛有家用漂白粉(不低于10%)的塑料容器中,所有的实验器具必须在30%家用漂白粉溶液中浸泡至少1小时,戴上手套穿上防护服以避免皮肤及黏膜与试剂或样品萃取物接触,如果一旦接触,必须立即用大量水冲洗。
6.停止液为1N 盐酸,避免皮肤及黏膜接触,如果有喷洒,立即清除并用大量水冲洗,
所需材料(不提供)
1.实验室用蒸馏水或去离子水
2.甲醇(色谱级)
3.量筒
4.用于萃取样品及收集萃取液玻璃器皿
5.滤纸,Whatman GF/A及相当者
6.可吸取50ul容量的移液器及一次性吸头
7.可吸取50ul或100ul的八道移液器及一次性吸头
8.洗瓶
9.吸水纸
10.450nm的酶标仪
11.计时器
样品的准备
1.配制适量甲醇+水(7+3),混合并储存于密闭容器中。
2.粉碎好的样品过20目筛并彻底混合,不立即分析的样品需冷冻储存。
3.称取20g样品,量取100ml 70%的甲醇水到一干净的有盖容器中。
4.剧烈震荡3分钟。
5.静置2-3分钟,使样品沉淀。
6.用Whatman GF/A玻璃纤维滤纸过滤15ml萃取液,收集滤液到一干净容器中。
清洗液的准备
1.将清洗浓缩液倒入1L容积的容器中,加入实验室用蒸馏水。
2.将配好的清洗液转移至洗瓶中。
检测程序(注意标准及样品做重复,可以提高检测的准确度及精确度)
1.开始实验前要求试剂及样品萃取液达到室温。
2.取适量的孔条固定在微孔板架上,确定未使用的孔条,与干燥剂一同放入密封袋中保存。
3.加入50ul的酶标记物到微孔中。
4.加入50ul的样品及标准品到相应的孔中,注意使用一次性吸头防止交叉污染
5.加入50ul抗体溶液到微孔中,轻微震荡微孔板。
6.室温下孵育10分钟。
7.倒掉微孔中溶液,微孔中注满清洗液,然后到掉,重复3次,共4次洗板。
8.后一次清洗完后,倒掉孔中溶液,然后翻转微孔板在吸水纸上拍干。
9.每孔中加入100ul的底物溶液。
10.室温下孵育10分钟。
11.每孔中加入100ul停止液。
12.450nm读吸光度值。
结果判断
1.半定量结果的判定,可根据样品的吸光度值与标准的吸光度值来判定,样品的吸光度值低于某个标准的吸光度值,则说明样品的赭曲霉毒素含量大于此标准的赭曲霉毒素浓度,样品的吸光度值高于某个标准的吸光度值,则说明样品的赭曲霉毒素含量小于此标准的赭曲霉毒素浓度。
2.定量结果判定,需要以标准的吸光度值为X轴,标准浓度的半对数为Y轴绘制曲线图,将标准浓度及吸光度值的点用直线连接,根据样品的吸光度值在Y轴上即可找到相应样品的浓度,如果样品的吸光度值大于标准的吸光度值或小于小样品的吸光度值,即可说明此样品中赭曲霉毒素的含量小于3.0ppb或大于40ppb。
样品的计算
物质吸光度值平均吸光度值 ±SD%RSD%B0
0ppb1.5901.5861.588±0.0030.2100
3ppb1.3101.2701.290±0.0282.281.2
6ppb1.0060.9981.002±0.0060.663.1
18ppb0.5260.5430.534±0.0122.333.7
40ppb0.2770.2720.274±0.0041.417.3
适用
Beacon赭曲霉检测试剂盒利用竞争酶联免疫吸附原理定量检测赭曲霉毒素
检测原理
Beacon赭曲霉检测试剂盒是基于竞争性酶联免疫吸附检测法。用甲醇水震荡萃取粉碎样品中的赭曲霉毒素,过滤萃取物,然后进行免疫学检测。加入赭曲霉的酶标记物到已加有标准或样品的测试孔中,抗体被加入后反应开始,样品及酶标记物竞争结合连接在微孔上的抗体,10分钟培养后,倒掉孔中的溶液,洗掉微孔中未的结合赭曲霉毒素和酶标记物。加入无色的底物溶液,培养10分钟,所有结合的酶标记物使底物转化成蓝色物质。加入停止液然后读取吸光度值,未知浓度样品与标准吸光度值进行比较,就可以得到样品的赭曲霉毒素浓度。
特异性
Beacon赭曲霉毒素检测试剂盒对于赭曲霉毒素有很强的特异性。标准品设为赭曲霉A, 与赭曲霉B的交叉反应率为9.3%。
试剂及材料
若试剂盒保存在2-8℃,未拆开包装的试剂盒在标识的保质期之前均可放心使用。
1.真空包装,包含干燥剂的8×12的微孔板。
2.5瓶2ml浓度为0,3.0,6.0,18,40ng/ml(ppb)的赭曲霉标准品,(注意:因为谷物样品在萃取过程中1:5稀释,标准品实际上为设定标准浓度的1/5,原始样品的浓度无需换算。)
3.1瓶10ml的酶标记物。
4.1瓶10ml的鼠抗赭曲霉抗体。
5.1瓶14ml的底物溶液
6.1瓶14ml的停止液(注意:1N 盐酸,小心操作!)
7.1瓶50ml的20倍浓缩清洗浓缩液
8.操作说明书
注意事项
1.每种试剂适用于Beacon 赭曲霉毒素试剂盒。其他生产商的试剂不可替代本试剂盒中的任何试剂,不同批次之间的试剂不可混用。
2.试剂的稀释及污染以及程序中未提及的样品,均会导致结果失真。
3.不可使用过期试剂。
4.开始实验前试剂回温到室温(20-28℃),避免试剂在室温存放过久(>24小时)。
5.赭曲霉为极毒物质,将所有丢弃的液体倒入盛有家用漂白粉(不低于10%)的塑料容器中,所有的实验器具必须在30%家用漂白粉溶液中浸泡至少1小时,戴上手套穿上防护服以避免皮肤及黏膜与试剂或样品萃取物接触,如果一旦接触,必须立即用大量水冲洗。
6.停止液为1N 盐酸,避免皮肤及黏膜接触,如果有喷洒,立即清除并用大量水冲洗,
所需材料(不提供)
1.实验室用蒸馏水或去离子水
2.甲醇(色谱级)
3.量筒
4.用于萃取样品及收集萃取液玻璃器皿
5.滤纸,Whatman GF/A及相当者
6.可吸取50ul容量的移液器及一次性吸头
7.可吸取50ul或100ul的八道移液器及一次性吸头
8.洗瓶
9.吸水纸
10.450nm的酶标仪
11.计时器
样品的准备
1.配制适量甲醇+水(7+3),混合并储存于密闭容器中。
2.粉碎好的样品过20目筛并彻底混合,不立即分析的样品需冷冻储存。
3.称取20g样品,量取100ml 70%的甲醇水到一干净的有盖容器中。
4.剧烈震荡3分钟。
5.静置2-3分钟,使样品沉淀。
6.用Whatman GF/A玻璃纤维滤纸过滤15ml萃取液,收集滤液到一干净容器中。
清洗液的准备
1.将清洗浓缩液倒入1L容积的容器中,加入实验室用蒸馏水。
2.将配好的清洗液转移至洗瓶中。
检测程序(注意标准及样品做重复,可以提高检测的准确度及精确度)
1.开始实验前要求试剂及样品萃取液达到室温。
2.取适量的孔条固定在微孔板架上,确定未使用的孔条,与干燥剂一同放入密封袋中保存。
3.加入50ul的酶标记物到微孔中。
4.加入50ul的样品及标准品到相应的孔中,注意使用一次性吸头防止交叉污染
5.加入50ul抗体溶液到微孔中,轻微震荡微孔板。
6.室温下孵育10分钟。
7.倒掉微孔中溶液,微孔中注满清洗液,然后到掉,重复3次,共4次洗板。
8.后一次清洗完后,倒掉孔中溶液,然后翻转微孔板在吸水纸上拍干。
9.每孔中加入100ul的底物溶液。
10.室温下孵育10分钟。
11.每孔中加入100ul停止液。
12.450nm读吸光度值。
结果判断
1.半定量结果的判定,可根据样品的吸光度值与标准的吸光度值来判定,样品的吸光度值低于某个标准的吸光度值,则说明样品的赭曲霉毒素含量大于此标准的赭曲霉毒素浓度,样品的吸光度值高于某个标准的吸光度值,则说明样品的赭曲霉毒素含量小于此标准的赭曲霉毒素浓度。
2.定量结果判定,需要以标准的吸光度值为X轴,标准浓度的半对数为Y轴绘制曲线图,将标准浓度及吸光度值的点用直线连接,根据样品的吸光度值在Y轴上即可找到相应样品的浓度,如果样品的吸光度值大于标准的吸光度值或小于小样品的吸光度值,即可说明此样品中赭曲霉毒素的含量小于3.0ppb或大于40ppb。
样品的计算
物质吸光度值平均吸光度值 ±SD%RSD%B0
0ppb1.5901.5861.588±0.0030.2100
3ppb1.3101.2701.290±0.0282.281.2
6ppb1.0060.9981.002±0.0060.663.1
18ppb0.5260.5430.534±0.0122.333.7
40ppb0.2770.2720.274±0.0041.417.3