液相色谱分析食品成分（食品添加剂含量检测）（高效液相色谱）

液相色谱仪对食品成分分析的应用范围

食品检验与分析的内容很丰富，而且范围相当广泛，在各种食品中有许多成分是相同的，有一些成分则是不相同的。南京科捷食品成分分析液相色谱仪主要分析食品中的下列组分：各种营养成分分析，食品添加剂、有毒有害物质、香精香料分析、添加剂分析、脂肪酸甲酯分析、食品包装材料分析、农药及兽药残留、致癌物质的检测，腐败变质的动物性食品及掺假食品的检验等

检测仪器：高效液相色谱仪EX1600

主要配置：四元梯度泵、紫外检测器、7725I进样阀、C18柱、色谱工作站

1、营养成分分析

有机酸、碳水化合物、维生素、游离脂肪酸、氨基酸

2、食品添加剂和农药残留分析（高效液相色谱仪EX1600）

（1）防腐剂与甜味剂

可分离和测定浓缩果汁、软饮料、果酱、蚝油和人造黄油中的山梨酸和苯甲酸防腐剂，也可同时分析可乐饮料中的阿斯巴甜和糖精。

（2）合成色素

（3）农药和抗生素残留

高效液相色谱可对饮用水、牛奶、啤酒、谷物、马铃薯和猪肉等食品中的农药残留和抗生素残留的测定。

（4）食品毒素

   高效液相色谱用于测定大豆、鱼及贝类的多胺、次黄嘌呤、黄曲霉毒素、麻痹性贝毒素（saxitoxin）等食品毒素。

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高效液相色谱原理：高效液相色谱是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入供试品，由流动相带入柱内，在柱内各成分被分离后，依次进入检测器，色谱信号由记录仪或积分仪记录。

1.对仪器的一般要求

所用的仪器为高效液相色谱仪。色谱柱的填料和流动相的组分应按各品种项下的规定.常用的色谱柱填料有硅胶和化学键合硅胶。后者以十八烷基硅烷键合硅胶为常用,辛基键合硅胶次之,氰基或氨基键合硅胶也有使用；离子交换填料,用于离子交换色谱；凝胶或玻璃微球等，用于分子排阻色谱等。注样量一般为数微升。除另有规定外，柱温为室温，检测器为紫外吸收检测器。在用紫外吸收检测器时,所用流动相应符合紫外分光光度法。

正文中各品种项下规定的条件除固定相种类、流动相组分、检测器类型不得任意改变外，其余如色谱柱内径、长度、固定相牌号、载体粒度、流动相流速、混合流动相各组分的比例、柱温、进样量、检测器的灵敏度等，均可适当改变, 以适应具体品种并达到系统适用性试验的要求。

（高效液相色谱仪EX1600）

2.系统适用性试验

   按各品种项下要求对仪器进行适用性试验，即用规定的对照品对仪器进行试验和调整,应达到规定的要求；或规定分析状态下色谱柱的小理论板数、分离度和拖尾因子.

（1） 色谱柱的理论板数（n） 在选定的条件下，注入供试品溶液或各品种项下规定的内标物质溶液，记录色谱图，量出供试品主成分或内标物质峰的保留时间t<[R]>（以分钟或长度计，下同，但应取相同单位）和半高峰宽（W<[h/2]> ）,按n＝5.54（t<[R]>／W<[h/2]>）<2>计算色谱柱的理论板数，如果测得理论板数低于各品种项下规定的小理论板数，应改变色谱柱的某些条件（如柱长、载体性能、色谱柱充填的优劣等），使理论板数达到要求。

（2） 分离度 定量分析时，为便于准确测量，要求定量峰与其他峰或内标峰之间有较好的分离度。分离度（R）的计算公式为：　2（t<[R2]>－t<[R1]>） R＝ ──W<[1]>＋W<[2]> 式中 t<[R2]>为相邻两峰中后一峰的保留时间； t<[R1]>为相邻两峰中前一峰的保留时间； W<[1]>及W<[2]>为此相邻两峰的峰宽。 除另外有规定外，分离度应大于1.5。

（3） 拖尾因子 为保证测量精度，特别当采用峰高法测量时，应检查待测峰的拖尾因子（T）是否符合各品种项下的规定,或不同浓度进样的校正因子误差是否符合要求。拖尾因子计算公式为： W<[0.05h]> T＝────── 2d<[1]> 式中 W<[0.05h]>为0.05峰高处的峰宽； d<[1]>为峰极大至峰前沿之间的距离。 除另有规定外，T应在0.95～1.05间。 也可按各品种校正因子测定项下，配制相当于80％、100％和120％的对照品溶液，加入规定量的内标溶液，配成三种不同浓度的溶液，分别注样3次,计算平均校正因子，其相对标准偏差应不大于2.0％。

3.测定法

定量测定时，可根据样品的具体情况采用峰面积法或峰高法。但用归一法或内标法测定杂质总量时，须采用峰面积法。

（1） 面积归一化法 测定供试品（或经衍生化处理的供试品）中各杂质及杂质的总量限度采用不加校正因子的峰面积归一法。计算各杂质峰面积及其总和，并求出占总峰面积的百分率。但溶剂峰不计算在内。色谱图的记录时间应根据各品种所含杂质的保留时间决定，除另有规定外,可为该品种项下主成分保留时间的倍数。

（2） 主成分自身对照法 当杂质峰面积与成分峰面积相差悬殊时，采用主成分自身对照法。在测定前，先按各品种项下规定的杂质限度，将供试品稀释成一定浓度的溶液作为对照溶液，进样，调节检测器的灵敏度或进样量，使对照溶液中的主成分色谱峰面积满足准确测量要求。然后取供试品溶液，进样，记录时间，除另有规定外，应为主成分保留时间的倍数。根据测得的供试品溶液的各杂质峰面积及其总和并和对照溶液主成分的峰面积比较，计算杂质限度。（高效液相色谱仪EX1600）

（3） 内标法测定供试品中杂质的总量限度 采用不加校正因子的峰面积法。取供试品,按各品种项下规定的方法配制不含内标物质的供试品溶液,注入仪器,再配制含有内标物质的供试品溶液，在同样的条件下注样。记录的时间除另有规定外，应为该品种项下规定的内标峰保留时间的倍数，色谱图上内标峰高应为记录仪满标度的30％以上，否则应调整注样量或检测器灵敏度。

技术参数:

EX1600HP四元低压梯度泵
流量范围：0.001～9.999ml/min
　 R S D：<0.06%
  脉  动：0.1Mpa
工作压力：42MPa

EX1600PREP 半制备泵

 流量范围：0.01～40ml/min
　  R S D：<1%
   脉  动：0.2MMPa
工作压力：20MMPa
EX1600UV 紫外检测器：
波长范围：190～700nm（D2灯）、 190～900nm（D2+W灯）
基线噪音：≤±0.2×10-5AU （空池，在特定条件下）
基线漂移：≤0.3×10-4AU/hr （空池，在特定条件下）
小检测量：1×10-8g/ml（萘/甲醇溶液）
波长准确度：1nm

波长精密度：0.1nm以下

EX1600RI 示差检测器 :
折光指数范围：1.00-1.75

流量范围：0.2-3.0ml/min
测定范围：0.25-512uRIU 
噪    音：2.5nRIU以下（水封入，灵敏度，1.5sec）
池 容 量：8ul
波 动 值：0.2uRIU/h（水；1ml/min；PURGE OFF）

直线性范围：600uRIU以上
偏置调整范围：10uRIU
偏置分解能：50nRIU

EX1600AS自动进样系统 
进样范围:1~5000μL增量为1μL（10mL进样环可选）

注射器体积:500μL（2500μL可选）

样品容量:2×48进样盘（2mL进样瓶）；（12孔进样盘、96孔384孔多孔板可选）

进样阀切换时间:<100ms

进样针定位精度:≤0.6mm

进样循环时间:17s（包括洗针60s）

进样方式:全定量环进样、部分定量环进样、携带进样

进样重复性:全定量环方式RSD<0.3%；部分定量环方式RSD<0.5%；携带进样方式RSD<1.0%

进样残留:<0.05%

制冷范围:4℃至室温以下3℃

噪音:<70dB

EX1600CO 柱温箱
控温范围：室温上10-85度、

温度设定范围：4℃-85℃
温度精度：0.1℃

◆ 南京科捷还有以下专用液相色谱:

☆ 氧化型染发剂中对苯二胺的HPLC测定方法

☆ 化妆品成分检测专用液相色谱仪

☆ 海产品中四种抗生素检测（土霉素、四环素、金霉素、氯霉素）液相色谱仪

☆ 烟叶中的游离氨基酸含量检测专用液相色谱仪

☆ 水产品中有毒有害物质检测液相色谱仪

☆ 血液成分检测专用液相色谱仪

☆ 农药残留分析检测专用液相色谱仪

☆ 医药溶剂成分检测专用液相色谱仪

☆ 奶制品成分检测（三聚氰胺）专用液相色谱仪

☆ 饮料,自来水成分检测专用液相色谱仪

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