此固相ELISA试剂盒利用的夹心法原理。微孔中包被了羊抗兔抗体。之后加入的液态抗体可以结合到抗原分子的一个抗原决定簇上，而抗原分子可在温育期内结合到固相抗体上。样品中的抗原与酶标二抗一起在微孔内温育，此酶标二抗可结合到抗原分子上的另一不同表位上。加入底物液后，溶液所显示的颜色强度与样品中抗原的量成正比。样品的结果可直接从标准曲线上读取。

二、ELISA试剂盒实验操作的常见问题：

1. 问－－客户用48T试剂盒，大概只有十个样所以他一次用不完那么多板条，但是他想做两次，可封板膜只有一张，那如果用完了怎么办？可以用什么别的东西取代吗？

答－－可以把封板膜剪掉，用多少剪多少也可以用封口膜替代。

2. 问－－实验过程中温育是放在哪温育呢？

答－－可以在水浴箱、细胞培养箱和烘干箱里面都行，只要恒定温度为37度。

三、ELISA技术的性能

    免疫酶技术的主要试剂为固相的抗原或抗体、酶标记的抗原或抗体和与标记酶直接关联的酶反应底物。可作固相载体的物质很多，常用的是聚苯乙烯。

    “猪皮质酮/肾上腺酮(CORT)ELISA试剂盒”聚苯乙烯具有较强的吸附蛋白质的性能，抗体或蛋白质抗原吸附其上后保留原来的免疫活性。聚苯乙烯为塑料，可制成各种形式，在测定过程中，它作为载体和容器，不参与化学反应，加之它的价格低廉，所以被普遍采用。

四、OD值的范围

    在ELISA后步骤中OD值的范围也是有一定讲究的，不容小觑。说到OD值范围，我公司业务员在售后问题的处理过程中也常会有客户咨询其范围是多少。其实是不一定的，我们以AβELISA为例，2以上就会偏饱和，变化不容易做出来，所以一般把model组控制在0.8-1.5，而control组的话基本跟空白差不多，不到0.1。

    所以，一般情况下我们会建议先做个标曲以及样品的梯度稀释，然后选择在标曲中间位置的样品稀释度作为以后的参照稀释度。

    同时，也与使用的detector有关，detector有自己的检测范围和线性范围。如果实验室使用的仪器，说明书上说检测范围是0~4，线性范围是0~3，但我们自己的实验结果显示的线性范围是0~2OD。如果只检测空白的没有经过处理的Elisa孔，大致在0左右。

五、“猪皮质酮/肾上腺酮(CORT)ELISA试剂盒”代测服务

1. 服务项目         内容说明                     提交结果     周期

2. 间接法ELISA检测  客户提供检测材料             检测试验报告 1周

3. 夹心法ELISA检测  客户提供检测材料和检测试剂盒 检测试验报告 1周

4. 竞争法ELISA检测  客户提供检测材料和检测试剂盒 检测试验报告 2周
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