兔膜联蛋白A5(ANXA5) ELISA 试剂盒 兔Apelin 17(AP17) ELISA 试剂盒  

试剂盒组成

1. 酶标板：用于包被抗原和加入酶标抗体；

2. 酶标抗体：与待测血清中的、、、、结合；

3. 抗原：用于包被酶标板，与待测血清中的、、、、结合；

4. 阴性对照血清：用于设置阴性和阳性对照；

5. 阳性对照血清：用于设置阴性和阳性对照；

6. 洗涤液：用于清洗酶标板；

7. 底物：用于显色反应；

8. 终止液：用于终止显色反应。

操作步骤

1. 准备工作

（1）将试剂盒从冰箱中取出，放置至室温；

（2）准备所需的试剂和样品；

（3）将酶标板用洗涤液清洗干净。

2. 包被抗原

（1）将抗原按照说明书要求稀释后，加入酶标板孔中，每孔100μL；

（2）将酶标板轻轻摇晃，使抗原充分覆盖酶标板孔底部；

（3）将酶标板放入湿盒中，4℃孵育过夜。

3. 洗涤和干燥

（1）取出酶标板，用洗涤液清洗5次，每次清洗时间为1分钟；

（2）用吸水纸轻轻吸干酶标板表面的水分。

4. 加样和孵育

（1）在每个酶标板孔中加入100μL待测血清；

（2）将酶标板轻轻摇晃，使血清充分覆盖抗原；

（3）将酶标板放入湿盒中，37℃孵育1小时。

5. 洗涤和干燥

（1）取出酶标板，用洗涤液清洗5次，每次清洗时间为1分钟；

（2）用吸水纸轻轻吸干酶标板表面的水分。

6. 加酶标抗体

（1）在每个酶标板孔中加入100μL酶标抗体；

（2）将酶标板轻轻摇晃，使酶标抗体充分覆盖抗原；

（3）将酶标板放入湿盒中，37℃孵育1小时。

7. 洗涤和干燥

（1）取出酶标板，用洗涤液清洗5次，每次清洗时间为1分钟；

（2）用吸水纸轻轻吸干酶标板表面的水分。

8. 加底物显色

（1）在每个酶标板孔中加入100μL底物溶液；

（2）将酶标板轻轻摇晃，使底物溶液充分覆盖抗原；

（3）将酶标板放入湿盒中，37℃孵育15-30分钟。

9. 终止反应并测量吸光度值

（1）在每个酶标板孔中加入50μL终止液；

（2）立即用酶标仪测量各孔的吸光度值。

计算

以标准物的浓度为横坐标（对数坐标），OD值为纵坐标（普通坐标），在半对数坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

兔Apelin 17(AP17) ELISA 试剂盒  

实验注意事项

1. 保证试剂盒的质量：选择正规厂家生产的试剂盒，确保试剂盒的质量和稳定性。

2. 严格控制实验条件：实验过程中要严格控制温度、pH值、离子强度等条件，以保证实验结果的准确性。

3. 避免交叉污染：实验过程中要避免交叉污染，确保每个步骤使用的试剂和材料都是清洁无污染的。

4. 标准化操作：实验操作要标准化，严格按照试剂盒说明书进行操作，避免人为误差对实验结果的影响。

5. 定期校准：定期对实验仪器进行校准，确保仪器的准确性和稳定性。

6. 保存好实验数据：实验过程中要保存好实验数据，以便后续分析和处理。

试剂盒性能：

1. 检测范围：1.95 nmol/L –100 nmol/L。

2. 灵敏度：低检测浓度小于0.78 nmol/L。

3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4. 重复性：板内变异系数小于10% ，板间变异系数小于15% 。

合作单位:

中国医科大学、复旦大学、北京大学、贵阳医学院、中国农业大学

天津疾控中心、江南大学、山东大学、青岛大学、香港大学

云南省产品质量监督检验研究院

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