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上海笃玛生物科技有限公司

产品介绍

查找:鸡表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒

价 格:¥2600

型 号:

产品完善度:

生产地:其他访问量:0次

发布日期:2023/12/25 12:03:55

更新日期:2024/3/19 16:52:45

详细内容

 查找:鸡表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒

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适用的样本类型

血清、血浆、细胞上清液、胸腹水、脑脊液、处理后的固体样本等

检测方法

双抗体夹心法

用途

科学研究

试剂盒性能

有效期:6个月 保存条件:2-8℃,避光防潮保存

准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数 R 值,大于等于 0.9600

特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应

重复性:板内、板间变异系数均小于 15%

查找:鸡表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒

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检测原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联吸附试验(ELISA)。往预先包被相关指标的抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的相关指标呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法

1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心 10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心 30 分钟取上清。

3. 细胞上清液:3000 转离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心 10 分钟取上清。

5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解 冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品

1. 酶标仪(450nm)

2. 加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒温箱

操作注意事项

1. 试剂盒保存在 2-8℃,使用室温平衡 20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。

3. 浓度为 0 的标准品可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释 5 倍,终结果乘以5才是样本终浓度。

4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5. 所有液体组分使用充分摇匀。

6. 若中英文说明书有误,请以中文说明书为准。

7. 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按 1:20 稀释,即 1 份的 20×洗涤缓冲液加 19 份的蒸馏水。

8. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

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洗板方法

1.手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置 1min 后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板 5次。

2.自动洗板机:每孔注入洗液 350μL,浸泡 1min,洗板 5 次。

试剂盒组成

名称                96 孔配置         48 孔配置            备注

微孔酶标板       12 孔×8 条        12 孔×4 条          无

标准品              0.5mL               0.5mL             按说明书进行稀释

标准品稀释液      6mL                 3mL              按说明书进行稀释

样本稀释液         6mL                 3mL              按说明书进行稀释

检测抗体-HRP     6mL                 3mL                 无

20×洗涤缓冲液    20mL               20mL             按说明书进行稀释

底物 A              6mL                 3mL                  无

底物 B              6mL                 3mL                  无

终止液              6mL                 3mL                   无

封板膜              2 张                 2 张                  无

说明书              1 份                 1 份                  无

自封袋              1 个                 1 个                  无

操作步骤 

1.从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回 4℃。

2. 设置标准品孔、样本孔和空白孔,空白孔什么都不加;标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL;

3. 待测样本孔先加待测样本 10μL,再加样本稀释液 40μL;

4. 随后标准品孔和样本孔中(空白孔不加)加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体 50μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。

5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置 1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗 板 5 次(也可用洗板机洗板)。

6. 所有孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。

7. 所有孔加入终止液 50μL,15min 内,在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。

结果判断

 绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。

免责声明

试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或生物体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担, 本公司概不负责。

严格按照说明书操作,不同批号不可交换使用,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。

 

 

本试剂盒采用双抗体夹心法酶联吸附试验(ELISA)。往预先包被捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并洗涤。

用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。

此套件的交货时间为2-3天。

*保存温度:2 - 8 C。

*保质期:6个月。

*国内快递.

凡在本公司购买ELISA试剂盒,可提供免费待测服务,视样本数量而定出结果时间,一般一周内出检测结果!

 

 

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