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北京雅安达生物技术有限公司

产品介绍

兔白细胞介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒厂家

价 格:¥1

型 号:

产品完善度:

生产地:其他访问量:22次

发布日期:2016/3/10 16:33:33

更新日期:2016/3/10 16:33:33

详细内容

 兔白细胞介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒厂家
实验步骤:
石蜡包埋组织切片 3~4μm 厚度 
1.烤片: 将待做切片置于切片架上,于 60℃恒温烤箱中至少烤 1 hr; 
2.脱蜡: 切片放入盛有二甲苯的容器中脱蜡 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次
10 min; 
3.水化: 切片经下行酒精水化,无水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%
乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自来水冲洗,ddH2O 洗 2×2min; 
4.抗原修复: 根据抗体说明书推荐方法进行抗原修复,常采用高压、微波(温
度达到 98~100℃)或酶消化修复法,室温自然冷却,自来水冲洗,ddH2O 洗 2×
2min,TBS 洗涤(2×2min)(具体修复方法见附 1)* 注:有些抗原勿需修复,
直接进入第 5 步封闭。 
5.封闭: 滴加试剂 B,37℃湿盒孵育 30 min; 
6.加一抗:滴加用试剂 C(即用型一抗),37℃湿盒孵育 2 hr 或 4℃过夜; 
7.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min); 
8.封闭: 滴加试剂 B,37℃湿盒孵育 10 min; 
9.加二抗: 滴加用抗体稀释液稀释的生物素化二抗(试剂 D),37℃湿盒中孵育
30 min; 
10.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min); 
11.封闭: 滴加试剂 Tween 20,37℃湿盒孵育封闭 20 min; 
12.加 HRP-SA: 滴加用试剂 C 稀释的试剂 E(1:50~200,终浓度 5~20 nM),37
℃湿盒中孵育 30 min; 
13.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min),TBS 洗涤(2×5 min); 
14.显色:应用 DAB 溶液(试剂 F)显色; 
15.复染:自来水充分冲洗,复染,脱水,透明; 
16.封片: 待组织标本干后,用试剂缓冲甘油封固剂封片; 
17.观察成像: 显微镜下观察成像。

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