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替代JC-1,MITO-ID系列线粒体膜电位检测试剂盒方案
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发布日期:2022/4/21 16:28:50
更新日期:2022/4/21 16:28:50
详细内容
JC-1是种广泛用于检测线粒体膜电位△Ψm的理想荧光探针。JC-1染料表现出电势依赖性的积聚在线粒体内。正常线粒体内,JC-1聚集在线粒体基质中形成聚合物,聚合物发出强烈的红色荧光(Ex=585 nm, Em=590 nm);不健康的线粒体由于膜电位的下降或丧失,JC-1只能以单体的形式存在于胞浆中,产生绿色荧光(Ex=514 nm, Em=529 nm)。因此颜色的变化非常直接的反映出线粒体膜电位的变化。线粒体的去J化程度也可以通过红/绿荧光强度的比例来衡量。
线粒体膜电势的破坏是细胞凋亡早期发生的个标志性事件。细胞受到凋亡诱导后线粒体膜电位的变化使得膜的通透性发生改变。膜通透性的增加,使得线粒体蛋白包括细胞色素C、Smac/DIABLO、HtrA2/OMI、核酸内切酶G(EndoG)、凋亡诱导因子(AIF)等从线粒体基质释放到细胞浆。细胞色素C的释放伴随膜电位的完全丧失,进而引发细胞凋亡酶的联效应。
Enzo Life Sciences 艾美捷MITO-ID系列线粒体膜电位检测试剂盒——用种阳离子染料测量线粒体膜电位,根据膜电位状态发出绿色或橙色的荧光。在有能量的细胞(膜电位较高)中,染料在细胞质中以绿色荧光单体存在,同时在线粒体中以橙色荧光聚集体的形式聚集。然而,在线粒体膜电位受损的细胞(膜电位较低)中,染料主要以绿色荧光单体存在于整个细胞质中,在线粒体中不再表现出橙色荧光。
Enzo Life Sciences 艾美捷MITO-ID 线粒体膜电位检测试剂盒特点:
比JC-1荧光染料灵敏10倍,水溶性好;
耐光双发射染料;
无需漂洗/换液过程;
单独的MITO-lD测定可用于检测线粒体质量;
在较低的药物/剂量浓度下检测细胞毒性;
没有像JC-1配方那样的溶剂伪影。
Enzo Life Sciences 艾美捷MITO-ID 线粒体膜电位检测试剂盒的应用:
左图:HeLa细胞的线粒体用 MITO-ID 膜电位染料染色,并通过落射荧光显微镜观察。橙色荧光聚集体定位于线粒体(橙色通道),而绿色荧光单体主要染色细胞质(FITC通道)。
右图:对照组和处理组细胞的流式细胞术分析。Jurkat细胞未经处理(左),用1μM CCCP处理15分钟(右)。然后用MITO-ID 膜电位染料对细胞进行染色,并在FACS Calibur仪器上运行。