【结肠平滑肌细胞】下面是细胞株培养的具体无菌技术要点：

1. 实验开始前，无菌室和无菌操作台需要紫外光照射30到60分钟完全灭菌，用70%ethanol擦拭无菌操作台面，并且打开无菌操作台风扇运行10分钟之后，才可以进行实验操作。每次操作只能处理一株细胞株，即使培养基完全相同也不可共用培养基，以避免细胞间污染或失误混淆。实验完成后，请将实验物品拿出工作台，用70%ethanol再次擦拭无菌操作台面。操作间隔应该让无菌操作台运转10分钟到15分钟后，才能进行下一个细胞株的操作。

2. 无菌操作工作的区域应保持清洁和宽敞，必要物品（试管架、吸管、吸取器或吸管盒等）可以暂时放置，其它实验用品使用完毕后应移出，有利于空气流通。实验用品需70%ethanol擦拭后方可带入无菌操作台内。实验操作过程应在台面的中央无菌区域内完成，请勿在边缘非无菌区域进行操作。

3. 小心取用无菌实验物品，避免细菌污染。请勿触碰吸管尖头部和容器瓶口处，也不要在打开的容器正上方进行操作。容器打开后，请用手夹住瓶盖并轻握瓶身，倾斜大约45°角取用，尽量不要将瓶盖口朝上放置于桌面。

4. 工作人员应当首先注意自身安全，必须穿戴齐实验衣和实验手套后才能进行实验。对于病毒感染或是来自人类的细胞株应当特别小心操作，并选择适当等级的无菌操作台进行（至少是Class II）。操作过程中，应避免引起aerosol的产生，小心有毒性药品，例如DMSO和TPA等，并避免针头的伤害等等。

5. 定期检测下列项目：

5.1. CO2钢瓶的CO2压力

5.2. CO2培养箱的CO2浓度、温度、和水盘是否有污染（水盘的水需用无菌水，每周定时更换）。

5.3. 无菌操作台内的airflow压力，定期更换紫外线灯管和HEPA过滤膜，预滤网（300小时/预滤网，3000小时/HEPA）。

6. 水槽内可添加消毒剂（Zephrin 1:750），需定期更换水槽中的水。

【结肠平滑肌细胞】齐一生物友情提醒，本产品仅供科研使用，不得用于临床及诊断使用！

一细胞说明，具体详细请见细胞附带说明书

 二、客户自备试剂

1、PBS  

2、 2、RPMI-1640 培养基（不含 Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%双抗

3、0.25%  （W/V）胰蛋白酶（含 0.02% EDTA）

三、细胞背景

1、生长方式：贴壁

2、种属：Homo sapiens  人

四、培养条件

1、培养基：RPMI-1640 培养基（不含 Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%双抗

2、温度：37.0°C

3、气体:空气  95%，CO2 5%

【结肠平滑肌细胞】五、培养方法

 收到细胞后，在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况：

 如果细胞未长满，用 75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，留10ml 培养液继续培养。如果细胞已长满（达 80-90%）。即可进行传代，具六、体步骤如下：

1，弃去培养液，用PBS洗 1-2次。

2，向瓶内加入 1.0-2.0ml 胰蛋白酶液，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，吸取胰蛋白酶，加含有 6ml  含 10%血清的培养液，轻轻吹打细胞。

3，加入等量的的培养液，轻轻吹打混匀后吸出一半，分到新的培养

4，传代比例：1:2-1:3  

七、常见问题及解决方案

1、培养瓶有破裂，培养液有漏液：细胞极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老师解决。

2、细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉，留 10ml 培养液培养观察，细胞生长至汇合度 80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。

细胞培养代理品牌

细胞培养代理品牌

【结肠平滑肌细胞】齐一生物科技（上海）有限公司是一家专业生产和销售各种生化试剂,细胞株、原代细胞、菌种、医药中间体,标准品和对照品的大型化学科技公司. 齐一生物销售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490；Web:www.qiyibio.com

9240532  Cable, Shaker Encoder, AP98        CNY                                  

9240509  Hard Drive, Programmed, Win XP, AP196/98             CNY                                  

9239962  Upgrade App., BR MDx DSP CTM 48 PCR         CNY                                  

9239562  Assy, Fan Mounting, 60 CFM (Coherent)            CNY                                  

9019981  Vacuum test plate          CNY                            【结肠平滑肌细胞】   

9019484  Gasket, Carriage upper, CX1        CNY                                  

9241210  RCS, Premium Cover Platform-only,2PM,1yr      "This service agreement supplements the service coverage for the manual digene Hybrid Capture system) after the upgrade to a Rapid Capture System.

The Premium Cover RCS platform-only, 2 PM provides full service coverage for the Rapid Capture System. Costs for service visits are fully covered including travel, labor, ａnd parts. The agreement also includes two annual preventive maintenance visits, with costs for labor ａnd parts covered. With a Premium Agreement, there is a priority response time of 24 hours (1 working day)."    CNY                                  

9241207  QIAsymphony SP, Full Agreement The Full Agreement QIAsymphony provides full service coverage for the QIAsymphony System. Costs for service visits are fully covered including travel, labor, ａnd parts. The agreement also includes one annual preventive maintenance visit, with costs for labor ａnd parts covered. With a Full Agreement, there is a priority response time of 48 hours (2 working days).       CNY                                  

9241189  User Manual, QIAxcel 01/08 (WW)             CNY                                  

9237330  Upgrade, BR & 4 ext. devices w. sched.      Upgrade BioRobot with four approved integration devices using scheduling software  CNY                                  

9237169  Bottle Waste           CNY                                  

9233214  Tubing, waste, PVC, 8/12, (per m)             CNY                                  

9237125  Upgrade App., DNeasy 96     "Take advantage of our instrumentation ａnd molecular biology expertise to install

DNeasy 96 on your BioRobot System.  The onsite protocol development visit includes

all travel ａnd labor for the visit to install the standard QIAGEN DNeasy protocol, Plus a

DNeasy  96 Tissue Kit (4-plate) SAP# 69581"    CNY                                  

9237107  Protocol Dev./Opt., on-site (3-days)     The QIAGEN BioRobot Systems Protocol Development/Optimization On-Site Visit includes all travel ａnd labor charges for a site visit up to 3 days by a QIAGEN Instrumentation Service Specialist to write and/or opimize protocols for the BioRobot System. Parts, consumable chemistries, ａnd accessories not included. Custom protocols are the sole responsibility of the customer ａnd neither warrantied nor guaranteed. CNY                                  

9232993  PCB, YZ-Connection, BR8            CNY                                  

9232971  Syringe pump Board             CNY                                  

9236410  Stacker, deepwell, TWI         CNY                                  

9236362  Fuse 2A, 250VAC, Fast Acting             CNY                                  

9236356  Sample Needle, long             CNY                                  

9236352  Tubing, Valve to Pump          CNY                                  

9236335  Sensor Distribution Board             CNY                            【结肠平滑肌细胞】   

9236157  User manual, RapidPlate        CNY                                  

9236150  Locator Plate, 96 well&Reservoir,BR RP             CNY                                  

9236148  Locator Plate, 384 well, BR Rapid Plate              CNY                                  

9230679  Rack for reagents, Trough IBG            CNY                                  

9021123  Valve Manifold, Upper, DCU         CNY                                  

9021102  Skin Panel, Lower Left Side, DCU              CNY                                  

9021049  Set, transparent panel, Qsym        CNY                                  

9021026  Set, cables, transfer module, Qsym             CNY                                  

9021012  Controller, Z Axis, VR, DCU         CNY                                  

9020993  Pipettor Assembly, DCU        CNY                                  

9020907  Cover, HEPA filter sys, SMC, QGX             CNY                                  

9020905  UV light assembly, SMC, QGX            CNY                                  

QYBS6312     人狂犬病病毒IgG抗体测定试剂盒    48T                            

QYBS6313     动物狂犬病病毒IgG抗体测定试剂盒       48T 供研究用                           

QYBS6314     破伤风IgG抗体测定试剂盒       48T 供研究用                           

QYBS6315     出血热IgG抗体测定试剂盒       48T 供研究用                           

QYBS6316     风疹病毒IgG抗体测定试剂盒    48T 供研究用                           

QYBS6317     麻疹病毒IgG抗体测定试剂盒    48T 供研究用                           

QYBS6318     脊髓灰质炎病毒IgG抗体测定试剂盒       48T 供研究用                           

QYBS6319     腮腺炎病毒IgG抗体测定试剂盒       48T 供研究用                           

QYBS6320     乙型脑炎病毒IgG抗体测定试剂盒    48T 供研究用                           

QYBS6321     甲型肝炎病毒IgG抗体测定试剂盒    48T 供研究用                           

QYBS6322     百日咳IgG抗体测定试剂盒       48T 供研究用                           

QYBS6323     白喉IgG抗体测定试剂盒    48T 供研究用                           

QYBS6324     A群脑膜炎IgG抗体测定试剂盒 48T 供研究用                           

QYBS6325     C群脑膜炎IgG抗体测定试剂盒 48T 供研究用                           

QYBS6326     流感病毒IgG抗体测定试剂盒    48T 供研究用                           

QYBS6350     梅毒甲苯胺红不加热血清试验诊断试剂    96T                             【结肠平滑肌细胞】

QYBS6351     弓形虫IgM抗体测定试剂盒       48T 供研究用                           

QYBS6352     弓形虫IgG抗体测定试剂盒       48T 供研究用                           

QYBS6353     风疹病毒IgM抗体测定试剂盒   48T 供研究用                           

QYBS6354     麻疹病毒IgM抗体测定试剂盒   48T 供研究用                           

QYBS6355     巨细胞病毒IgM抗体测定试剂盒       48T 供研究用                           

QYBS6356     巨细胞病毒IgG抗体测定试剂盒       48T 供研究用                           

QYBS6357     单纯疱疹病毒I+II型IgM抗体测定试剂盒      48T 供研究用                           

QYBS6358     狂犬冱疫苗效力测定试剂盒       48T 供研究用                           

QYBS6359     乙型脑炎疫苗效力测定试剂盒    48T 供研究用                           

QYBS5001     肠杆菌科细菌生化编码鉴定管    11种X15支   用于肠杆菌科细菌鉴定用                        

QYBS5002     肠杆菌科细菌生化编码鉴定管GYZ-15e    15种X10支 用于肠杆菌科细菌鉴定用                        

QYBS5003     肠科生化编码管GYZ-15E   15种X10支 用于肠杆菌科细菌鉴定用                        

QYBS5004     肠杆菌科细菌生化编码鉴定管GYZ-11e    11种X15支   用于肠杆菌科细菌鉴定用                        

QYBS5005     肠杆菌科细菌生化常规鉴定管    11种X15支   用于肠杆菌科细菌鉴定用                        

QYBS5006     阪崎肠杆菌生化鉴定试剂盒       9种×10支    按GB/T4789.40-2008配制