【神经少突起前质胶质细胞】下面是细胞株培养的具体无菌技术要点：

1. 实验开始前，无菌室和无菌操作台需要紫外光照射30到60分钟完全灭菌，用70%ethanol擦拭无菌操作台面，并且打开无菌操作台风扇运行10分钟之后，才可以进行实验操作。每次操作只能处理一株细胞株，即使培养基完全相同也不可共用培养基，以避免细胞间污染或失误混淆。实验完成后，请将实验物品拿出工作台，用70%ethanol再次擦拭无菌操作台面。操作间隔应该让无菌操作台运转10分钟到15分钟后，才能进行下一个细胞株的操作。

2. 无菌操作工作的区域应保持清洁和宽敞，必要物品（试管架、吸管、吸取器或吸管盒等）可以暂时放置，其它实验用品使用完毕后应移出，有利于空气流通。实验用品需70%ethanol擦拭后方可带入无菌操作台内。实验操作过程应在台面的中央无菌区域内完成，请勿在边缘非无菌区域进行操作。

3. 小心取用无菌实验物品，避免细菌污染。请勿触碰吸管尖头部和容器瓶口处，也不要在打开的容器正上方进行操作。容器打开后，请用手夹住瓶盖并轻握瓶身，倾斜大约45°角取用，尽量不要将瓶盖口朝上放置于桌面。

4. 工作人员应当首先注意自身安全，必须穿戴齐实验衣和实验手套后才能进行实验。对于病毒感染或是来自人类的细胞株应当特别小心操作，并选择适当等级的无菌操作台进行（至少是Class II）。操作过程中，应避免引起aerosol的产生，小心有毒性药品，例如DMSO和TPA等，并避免针头的伤害等等。

5. 定期检测下列项目：

5.1. CO2钢瓶的CO2压力

5.2. CO2培养箱的CO2浓度、温度、和水盘是否有污染（水盘的水需用无菌水，每周定时更换）。

5.3. 无菌操作台内的airflow压力，定期更换紫外线灯管和HEPA过滤膜，预滤网（300小时/预滤网，3000小时/HEPA）。

6. 水槽内可添加消毒剂（Zephrin 1:750），需定期更换水槽中的水。

【神经少突起前质胶质细胞】齐一生物友情提醒，本产品仅供科研使用，不得用于临床及诊断使用！

一细胞说明，具体详细请见细胞附带说明书

 二、客户自备试剂

1、PBS  

2、 2、RPMI-1640 培养基（不含 Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%双抗

3、0.25%  （W/V）胰蛋白酶（含 0.02% EDTA）

三、细胞背景

1、生长方式：贴壁

2、种属：Homo sapiens  人

四、培养条件

1、培养基：RPMI-1640 培养基（不含 Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%双抗

2、温度：37.0°C

3、气体:空气  95%，CO2 5%

【神经少突起前质胶质细胞】五、培养方法

 收到细胞后，在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况：

 如果细胞未长满，用 75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，留10ml 培养液继续培养。如果细胞已长满（达 80-90%）。即可进行传代，具六、体步骤如下：

1，弃去培养液，用PBS洗 1-2次。

2，向瓶内加入 1.0-2.0ml 胰蛋白酶液，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，吸取胰蛋白酶，加含有 6ml  含 10%血清的培养液，轻轻吹打细胞。

3，加入等量的的培养液，轻轻吹打混匀后吸出一半，分到新的培养

4，传代比例：1:2-1:3  

七、常见问题及解决方案

1、培养瓶有破裂，培养液有漏液：细胞极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老师解决。

2、细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉，留 10ml 培养液培养观察，细胞生长至汇合度 80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。

细胞培养代理品牌

细胞培养代理品牌

【神经少突起前质胶质细胞】齐一生物科技（上海）有限公司是一家专业生产和销售各种生化试剂,细胞株、原代细胞、菌种、医药中间体,标准品和对照品的大型化学科技公司. 齐一生物销售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490；Web:www.qiyibio.com

9236941  SlideShett,  SamTrak MDx         CNY                                  

9019124  Fan - peltier, PyroQ96ID              CNY                                  

9019117  Fan - rear, PyroQ96ID          CNY                                  

9019070  PyroMark Thermoplate Low, PyroQ96ID    Holder for placement of PyroMark Q96 Plate Low on heat block during annealing step prior to PyroMark Q96 ID analysis.      CNY                                  

9019009  Plunger unit, EZ1xl        CNY                                  

9019007  Magnet unit, w reflector, EZ1xl            CNY                                  

9018962  QX, Air compressor             CNY                                  

9018943  Adapter, MagNa Pure LC 32-Well Plate        CNY                                  

9022711  Lid, Silver, DML3000           CNY                                  

9016004  BioSprint 15 microtube tray   "tray on which the microcentrifuge strips sit during a run.

None of our protocols use microtubes so this is an accessory that most likely KF customers would use. We do not ship this tray with the instrument"       CNY                                  

9016002  Magnet head for deep well plate, BS96         CNY                                  

9015863  EZ1 DNA DRD BLD Card     Pre-programmed card for BioRobot EZ1 protocols for dried blood samples      CNY                                  

9015825  Upg. Kit, V-Motor position, BR8 (ISI22)             CNY                            【神经少突起前质胶质细胞】   

9015794  Software Twister II V2.0   CLARA  V2.3.x            CNY                                  

9015637  AC fuse, 230 V, 4A, M48             CNY                                  

9015607  LiquiChip Maintenance Kit            CNY                                  

9015541  Filter, w.glue ａnd cleaning            CNY                                  

9015531  Controller, temperature          CNY                                  

9019164  Tool, O-Ring change, Qsym         CNY                                  

9019162  Cable kit - X/Y, PyroQ96MD        CNY                                  

9019156  Motor - X/Y, PyroQ96MD            CNY                                  

9019149  Fan - IPC 40x40, PyroQ96MD            CNY                                  

9014555  Power Supply Grounding Kit        CNY                                  

9014435  LiquiChip Fluid Module IS            CNY                                  

9022193  Transport Lock, PyroQ24            CNY                                  

9022056  Tool, o-shoot test liquid 100ML, RGQ         CNY                                  

9021980  Set, purge filters (10), QX            CNY                                  

9021670  Adapter, tubes, 2 ml, v2, Qsym            CNY                                  

9238612  Collet chuck screw        CNY                            【神经少突起前质胶质细胞】   

9238561  Upgrade App., Ni-NTA Superflow large              CNY                                  

9238513  Lubrication oil, Elaklub, BR8 RD          CNY                                  

9238466  Lubricant, silicon fluid          CNY                                  

9238223  Laser Alignment Solution (10ml)          CNY                                  

QY-L0036       白当归脑26091-79-2    Byakangelicol  26091-79-2     20mg                   

QY-L0037       白当归素19573-01-4    Byakangelicin  19573-01-4     20mg                   

QY-L0038       欧当归内酯A88182-33-6     Levistilide A    88182-33-6     20mg                   

QY-L0039       二氢欧山芹醇当归酸酯5058-13-9      Columbianadin       5058-13-9      20mg                   

QY-L0040       二氢欧山芹素3804-70-4      Columbianetin 3804-70-4      20mg                   

QY-L0041       白杨素480-40-0    Chrysin   480-40-0 20mg                   

QY-L0042       7-O-甲基白杨素    "7-O-Methylchrysin

"             20mg                   

QY-L0043       白藜芦醇501-36-0       Resveratrol     501-36-0 20mg                    【神经少突起前质胶质细胞】

QY-L0044       虎杖苷27208-80-6       Polydatin 27208-80-6     20mg                   

QY-L0045       乙酰白藜芦醇42206-94-0    AcetylResveratrol   42206-94-0     20mg                   

QY-L0046       苯甲酰新乌头原碱63238-67-5    Benzoylmesaconine 63238-67-5     20mg                   

QY-L0047       苯甲酰乌头原碱466-24-0    Benzoylaconine      466-24-0 20mg                   

QY-L0048       苯甲酰次乌头原碱       Benzoylhypacoitine        20mg                   

QY-L0049       次乌头6900-87-4  Hypaconitine   6900-87-4      20mg                   

QY-L0050       新乌头2752-64-9  Mesaconitine   2752-64-9      20mg                   

QY-L0051       乌头302-27-2       Aconitine 302-27-2 20mg                   

QY-L0052       高乌甲素32854-75-4    Lappaconitine(p)    32854-75-4     20mg                   

QY-L0053       乙酰乌头77181-26-1    Acetylaconitine       77181-26-1     20mg                   

QY-L0054       氢溴酸高乌甲素97792-45-5       Lappaconitine Hydrobromide 97792-45-5     20mg                   

QY-L0055       乌头原碱(滴定法95%)509-20-6  Aconine   509-20-6 20mg                   

QY-L0056       新乌头原碱                  20mg                   

QY-L0057       次乌头原碱                  20mg                   

QY-L0058       草乌甲素79592-91-9    Bulleyaconitine A；Crassicauline A       79592-91-9     20mg                   

QY-L0059       苯甲酸65-85-0      Benzoic acid   65-85-0   20mg                    【神经少突起前质胶质细胞】

QY-L0060       表告依春1072-93-1      Goitrine   1072-93-1      20mg                   

QY-L0061       靛玉红479-41-4    Indirubin 479-41-4 20mg                   

QY-L0062       靛蓝482-89-3       Indigo     482-89-3 20mg                   

QY-L0063       白桦脂酸472-15-1       Betulinic acid 472-15-1 20mg                   

QY-L0064       白桦脂醇473-98-3       Betulin     473-98-3 20mg                   

QY-L0065       白桦脂醛13159-28-9    Betulinicaldehyde    13159-28-9     20mg                   

QY-L0066       表白桦脂酸38736-77-5       Epibetulinic acid     38736-77-5     20mg