ELISA 检测的目的是为实验提供准确可靠的定量分析实验依据。为了保证实验数据的可靠性，在实验过程中必须坚持全面质量控制和全过程质量控制。在收集标本前都必须有一个完整的计划。齐一生物销售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490

注意事项：

◆   每个标本量收集体积＝  100ul × 检测种类，如要做复孔，标本量收集体积＝  100ul × 检测种类×2 。

◆   对于作某一个具体指标来说，先用一系列稀释度作一批标本测定，得出对实验有意义的一个稀释度（即测定剂量反应曲线），然后用一个适稀释度测定即可。

◆   收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本，储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，将标本及时分装后放在-20℃ 或-70℃ 条件下保存。避免反复冻融。标本 2 -8 ℃ 可保存48 小时.-20℃ 可保存1个月。 -70 度可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。

◆   血清标本采集时，应注意避免溶血，红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质，以 HRP为标记的 ELISA 测定中，溶血标本可能会增加非特异性显色。

【三聚氰胺试纸条】◆   为了保证尿液检测结果的准确性，必须正确收集尿液标本和保存。盛尿容器要清洁干燥。使用一次性的容器（如塑料尿杯），避免因用药并清洗不干净而造成的污染，影响检测结果。尿液标本必须新鲜，留取后，应及时检测或保存，以免细菌繁殖。因在室温中久置后（尤其是夏季）尿中磷酸盐等可析出结晶而干扰检测。

◆    标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染，菌体中可能含有内源性 HRP，也会产生假阳性反应。保存过久可发生聚合在 ELISA中可使本底加深。

◆   冻结标本融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀宜轻缓，避免气泡，可上下颠倒混和，不要在混匀器上强烈振荡。

◆   混浊或有沉淀的标本应先离心或过滤，澄清后再检测。

◆   反复冻融会使蛋白效价降低，所以待测标本如需保存作多次检测，宜少量分装冰存。也可加入适当防腐剂。

◆   如果您在实验中遇到任何特殊问题，敬请咨询 021-60348496标本类型

ELISA常见的标本一般包括：

◆   液体类标本：包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

◆   培养细胞

◆   组织标本

这些标本收集的时间、方法和保存都有一定的要求。

【三聚氰胺试纸条】标本的保存

一般说来，在 5 天内测定的标本可放置于 4℃，超过一周测定的需低温冻存。

对收集后当天进行检测的标本，储存在  4 ℃ 备用，如有特殊原因需要周期收集标本， 将标本及时分装后放在  -20 ℃ 或  -70 ℃ 条件下保存。避免反复冻融。 标本  2 -8 ℃ 可保存  48 小时，-20 ℃ 可保存  1 个月。-70 度可保存  6 个月。部分标本也可加入适当防腐剂，激素类标本需添加抑肽酶。标本的处理 可用作 ELISA 测定的标本十分广泛，体液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液）、细胞培养上清、细胞、组织等均可作标本以测定其中某种成份。有些标本可直接进行测定，有些则需经预处理。

◆ 血清：  

室温血液自然凝固  10-20 分钟后，离心  20 分钟左右（  2000-3000 转  / 分）。收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。  

◆ 血浆：  

应根据试剂盒的要求选择  EDTA 、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，加入  10 ％（  v/v ）抗凝剂 ( 0.1M 柠檬酸钠或  1% heparin 或  2.0%EDTA.Na2) 混合  10-20 分钟后，离心  20 分钟左右（  2000-3000 转  / 分）。仔细收集上清如有沉淀形 成，应再次离心。  

【三聚氰胺试纸条】◆ 尿液、胸腹水、脑脊液：  

用无菌管收集。离心  20 分钟左右（  2000-3000 转  / 分）。仔细收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。  

◆ 细胞培养上清：  

检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心  20 分钟左右（  2000-3000 转  / 分）。仔细收集上清。检测细胞内的 成份时，用  PBS （  PH7.2-7.4 ）稀释细胞悬液，细胞浓度达到  100 万 /ml 左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心  20 分钟左右（  2000-3000 转 / 分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。  

◆ 细胞：

检测细胞的成份时，对于贴壁细胞，去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。加入适量裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞10 秒后，细胞就会被裂解。对于悬浮细胞，离心收集细胞，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍.加入适量裂解液, 用枪吹打把细胞吹散。用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装然后再裂解。充分裂解后，10000-14000g离心3-5 分钟，取上

清，即可进行后续操作。

【三聚氰胺试纸条】◆ 组织标本：  

切割标本后，称取重量。加入一定量的  PBS或组织蛋白萃取试剂，缓冲液中可加入蛋白酶抑制剂。用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心  20 分钟左右（  2000-3000 转  / 分）。仔细收集上清置于  -20 度或  - 70 度保存，如有必要，可以将样品浓缩干燥。分装后一份待检测，其余冷冻备用。齐一生物销售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490  

70022     Oligotex mRNA Mini Kit For 12 mRNA minipreps: 200 ul Oligotex Suspension, Small Spin Columns, Collection Tubes (1.5 ml), RNase-free Reagents ａnd Buffers  CNY                           

19560     Collection Microtubes (racked)     Nonsterile polypropylene tubes (1.2 ml), 960 in racks of 96       CNY                           

19157     QIAGEN Protease (30 AU)    4 x 7.5 Anson units per vial (lyophilized)      CNY                           

19075     Buffer AL       216 ml for 1000 preps   CNY                           

13343     Blood & Cell Culture DNA Midi Kit       25 QIAGEN Genomic-tip 100/G, QIAGEN Protease, Buffers     CNY                           

12981     QIAGEN Plasmid Plus Mega Kit (5)     QIAGEN Plasmid Plus Kits enable ultrafast, large-scale plasmid purification of pure plasmid DNA. The use of a vacuum manifold allows purification of up to 12 (Mega ａnd Giga) or up to 24 (Midi ａnd Maxi) samples in parallel with low hands-on needs. Low elution volumes yield highly concentrated plasmid DNA for direct use without ethanol precipitation. QIAGEN Plasmid Plus Kits also feature a novel wash buffer for endotoxin reduction. CNY                           

12381     EndoFree Plasmid Mega Kit (5)     5 QIAGEN-tip 2500, Reagents, 5 QIAfilter Mega-Giga Cartridges, Endotoxin-free Buffers    CNY                           

133282    NeXtalStock Trimethylamine N-Oxide (100)              CNY                            【三聚氰胺试纸条】

133259    NeXtalStock HEPES sod. salt pH 8.5 (200)         CNY                           

337630    qBiomarker SYBR Green ROX Mastermix (2)            CNY                           

4501163  artus EBV TM PCR Kit (24) CE           CNY                           

949004    Autopure RBC Lysis Solution (9500 ml)              CNY                           

336841    Cignal Reporter Assay Kit             CNY                           

990380    Rack Labeling Strips, Accessory Set            CNY                           

990012    Disposable Tips, 50µl (960)          CNY                           

330621    RT² SYBR Green ROX FAST Mastermix (8)              CNY                           

330620    RT² SYBR Green ROX  FAST Mastermix (2)            CNY                           

9010854  Motor, gripper V ａnd handler V            CNY                           

981400    Rotor-Disc OTV Kit (1) "Kit for optical temperature verification of Rotor-Gene systems (includes a Rotor-Disc preloaded with thermochromatic liquid crystals, fluorescent inserts, CD with calibration files)

REQUIRES ROTOR-DISC 72 ROTOR AND LOCKING RING OR ROTOR-DISC 72 STARTER KIT"  CNY                           

133244    NeXtalStock Sodium malonate pH 6.0 (200)        CNY                           

9010363  LabHand, standard for Plato 1              CNY                           

979105    PyroMark Q96 HS Tip Storage Box             CNY                           

310107    BioMag Goat Anti-Rat IgG (500ml)      BioMag goat anti-rat IgG secondary antibody suspension (1 mg/ml)   CNY                           

9002271  PyroMark Q24 Advanced Instrument           CNY                            【三聚氰胺试纸条】

206542    Type-it HRM PCR Kit (100)         CNY                           

206401    QIAGEN LongRange PCR Kit (20)       For 20 PCR rxns a 50 µl: Enzyme Mix (Taq ａnd Proofreading Enzyme, (5 u/µl), 10 x PCR Buffer for increased fidelity (contains dNTP´s), 25 mM MgCl2, 5 x Q-Solution    CNY                           

9012714  Tubing set, auto vac, BR8000              CNY                           

9012708  Peristaltic Pump Outlet Tubing 3100,4002           CNY                           

9002171  QIAcube (230V) HID Diff. Washing Station        CNY                           

929530    QX Alignment Marker 15 bp/600 bp (1.5ml)        CNY                           

971480    therascreen® EGFR Pyro Kit (24) CE         CNY                           

133214    NeXtalStock MMT pH 4.0 (200)          CNY                           

301702    HiPerFect Transfection Reagent (0,1ml)             CNY                           

QKT0729       层黏蛋白LN化学发光检测试剂盒            96T                     

QKT0730       Ⅲ型前胶原PCⅢ化学发光检测试剂盒             96T                     

QKT0731       Ⅳ型胶原C-Ⅳ化学发光检测试剂盒          96T                     

QKT0732       透明质酸HA化学发光检测试剂盒            96T                     

QKT0733       促甲状腺素TSH化学发光检测试剂盒             96T 北京福瑞生物                    

QKT0734       血清甲状腺素T4化学发光检测试剂盒            96T                     

QKT0735       血清三碘甲状腺原氨酸T3化学发光检测试剂盒            96T                     

QKT0736       血清游离四碘甲状腺原氨酸FT4化学发光检测试剂盒          96T                     

QKT0737       血清游离三碘甲状腺原氨酸FT3化学发光检测试剂盒          96T                     

QKT0738       甲状腺球蛋白TG化学发光检测试剂盒           96T                     

QKT0739       甲状腺球蛋白抗体TGA化学发光检测试剂盒         96T                     

QKT0740       促甲状腺激素受体抗体TRAb化学发光检测试剂盒        96T                     

QKT0741       甲状腺微粒体抗体TMAb化学发光检测试剂盒              96T                     

QKT0742       抗甲状腺过氧化物酶抗体Anti-TPO化学发光检测试剂盒             96T                     

QKT0743       血清反三碘甲状腺原氨酸rT3化学发光检测试剂盒              96T                      【三聚氰胺试纸条】

QKT0744       卵泡刺激素FSH化学发光检测试剂盒             96T                     

QKT0745       黄体生成素LH化学发光检测试剂盒        96T                     

QKT0746       人绒毛膜促性腺激素HCG/β-HCG化学发光检测试剂盒              96T                     

QKT0747       催乳素PRL化学发光检测试剂盒             96T                     

QKT0748       雌二醇E2化学发光检测试剂盒         96T                     

QKT0749       游离雌三醇FE3化学发光检测试剂盒              96T                     

QKT0750       孕酮PROGESTERONE化学发光检测试剂盒          96T                     

QKT0752       睾酮TEST化学发光检测试剂盒        96T                     

QKT0753       游离睾酮FreeTestosterone化学发光检测试剂盒             96T                     

QKT0754       C-肽C-PEPTIDE化学发光检测试剂盒             96T                     

QKT0755       胰岛素INSULIN化学发光检测试剂盒             96T                     

QKT0756       胰岛素样生长因子IIGF-I化学发光检测试剂盒              96T                     

QKT0757       抗人胰岛素抗体IAA化学发光检测试剂盒              96T                     

QKT0758       胰岛素原PROINS化学发光检测试剂盒           96T                     

QKT0759       谷氨酸脱羧酶抗体GAD65化学发光检测试剂盒            96T                     

QKT0760       铁蛋白Ferritin化学发光检测试剂盒         96T                      【三聚氰胺试纸条】

QKT0761       血清甲胎蛋白AFP化学发光检测试剂盒          96T                     

QKT0762       癌胚抗原CEA化学发光检测试剂盒          96T