1.准备工作：
1.1堆放：将待消毒的物品，予以妥善包扎，顺序地相互之间留有隙地，放置在消毒桶内的筛板上，这样有利于蒸汽的穿透，提高灭菌效果。
1.2加水：在主体内加入蒸馏水或离子水三升，连续使用时必须每次灭菌后补加水量，以免干热而发生重大事故。
1.3密封：将消毒桶放入主体内，然后将盖上的软管插入消毒桶内，侧凸管内对正盖与主体的螺栓槽，顺序地用力均匀地将对方位的螺母旋紧，使盖与主体密合。
1.4加热：将本器放在电源上，开始时，必须将放气阀推至垂直（开放）方位，使仪器内空气逸去，待见器内有较急蒸汽喷出时，应立即将摘子扳至水平（关闭）方位，随着热量的不断上升而产生的压力，则可在和表上体现出来。
1.5灭菌：当器内压力达到所需范围时，应随适当调低热量，使其维持恒压，同时开始按不同的物品和包装来控制其灭菌时间。
1.6干燥：对医疗器械、敷料、器皿等需要迅速干燥者，可于灭菌完毕时，立即将放气阀打开，使器内之压力蒸汽迅速排出，见压力表指示针回复至零位后，稍等1－2分钟，然后将盖打开，继续对本器加热10－15分钟即可。
1.7对瓶装溶液于灭菌终了时，切勿立即排放本器内之蒸汽，否则，瓶内溶液可因压力聚变而剧烈沸腾，溢出，甚至瓶子爆破。所以应当首先将热源拔掉，从使核武器在自然冷却至压力表指针回复零位，再等数分钟打开放气阀，将盖启开。

2.注意事项:
2.1整个灭菌过程中，必须保证器内有足够的水量。由于加热时，水分不断蒸发， 因此每消毒一次，都要重新加水，绝不允许“干热”。否则极易烧坏器身甚至引起爆炸，造成严重事故。为了安全，操作人员不得离开现场。
2.2灭菌物品:
2.2.1由于灭菌物品的种类、体积、密度和导热性能不同，它所需要的灭菌时间和压力也不一样。若物体的体积密度大，导热性能较差，灭菌时间可适当延长。一般来讲，要使其最内层的温度达到121℃；并持续一段时间，才能真正起到灭菌的作用。灭菌器所需时间和温度与压力对照表：
毒物类 灭菌保温时间 min 蒸汽压力 MPa 饱和蒸汽相对湿度℃
橡胶 类 15 0.105-0.11 121
敷料类 30-40 0.105-0.14 121-126
器皿类 15分 0.105-0.14 121-126
器械类 10 0.105-0.14 121-126
瓶装溶液类 20-40 0.105-0.14 121-126
2.2.2不同类型的物品不应放在一起进行灭菌。
2.2.3灭菌物品的体积不应包得太大，也不应放得过多，过紧。以免影响蒸汽透入。
2.2.4不耐热的物品以及对金属有腐蚀性的物品不应放入灭菌。
2.2.5未压盖的瓶装溶液，灭菌前，应用耐热橡胶塞（软木塞）将瓶口塞紧后，再用几层纱布压住瓶塞，并在瓶颈外连纱布一起用绳子固定。
2.2.6灭菌开始时，一定要将器内的空气排除干净。否则压力表上的读数，将是空气和水蒸汽两者的压力之和。结果是压力虽然达到了规定的数值而温度却达不到要求。
2.2.7灭菌终止后，可按照灭菌物品的不同性质和不同要求，进行快放气，慢放气和自然冷却。
2.2.8如果灭菌物品不会因压力和温度骤然下降面损坏，又要求灭菌后物品要干燥的，可快放气，待压力回至“0”位后，等一分钟，即可开盖，并继续加热5-10分钟，然后取出物品，即达干燥目的。
2.2.9灭菌物品是玻璃器皿，若放气过快，会引起玻璃器皿剧烈震动，温度急剧变化易使玻璃炸裂，故应慢放气。待压力表慢慢降至“0”位后，再将器盖打开少许，让器内温度逐步下降，15分钟以后，才能全开器盖，取出物品。
2.2.10若灭菌物品是压盖瓶装溶液，如生理盐水等。如果压力和温度骤然降低，会引起溶液剧烈的沸腾，甚至冲开瓶塞，玻璃瓶炸裂。应先关电源，让其自然冷却20—30分钟，以便使瓶内溶液的温度降至100℃以下，然后再放气，待压力表回到“0”位时，再将器盖打开少许，10-15分钟后，才能全开器盖，取出灭菌物品。
2.2.11应特别强调的是：在未放气，器内压力尚未降到“0”位以前，绝对不允许打开器盖，否则器内压力很大，灭菌物品将随高压气流一齐冲出，可能伤害人体，造成严重事故。