血清解冻采用逐步解冻法(-20℃→2—8℃→25℃或37℃),解冻过程中必须随时轻摇,使血清受热温度均匀。
血清凝絮物,血清解冻后会出现少量片状或絮状物析出,这主要是由于血清内不稳定蛋白变性、纤维蛋白析出形成沉淀物,实验证明沉淀物不会影响血清本身质量。
热灭活本产品除注明外均未灭活。如果必须灭活,请严格按照56℃30分钟(水浴)处理已解冻血清。
常温状态下短期融化并不会影响血清质量。
产品有效期,检定合格之日起有效期5年。
操作步骤 试管法(改良 Mayer 法)
1、致敏羊红细胞: 2%绵羊红细胞加等量稀释后的溶血素( 1:2000),混匀,置 37℃水浴 30min。
2、稀释血清:待测血清 0.2ml,加应用液 3.8ml,稀释度为 1:20。
3、配制溶血标准管:全溶血管:2%绵羊红细胞 2ml 加 8ml 蒸馏水,混匀。
50%溶血管:取全溶血管液 2ml 加缓冲液 2ml。
4、按表所示,依次加各成分于试管中,混匀,置 37℃水浴 30min, 第 10 管为非溶血对照:补体 CH50 测定试管法
5、结果测定:取出试管, 2000r/min 离心 10min,对照管应不溶血。肉眼比色,选与 50%溶血标准管相近二管,再用分光光度计测(波长 542nm、 0.5cm 比色杯) OD 值,
确定与标准管接近者为终点管,然后按下公式计算 CH50 值:
血清补体 CH50( U/ml) =( 1/血清用量)×稀释度。
如第 5 管为终点管,测待测血清中CH50为66.7U/ml。血清补体CH50正常值为50-100U/ml。
应用范围:
酶标试剂、免疫比浊试剂、免疫胶乳试剂生产、提取纯化抗体、组化实验中
对应抗原,或封闭对应杂抗体,测定对应抗原浓度,或抗原夹芯法测定对应
抗体,吸收杂抗原成分,层析纯化抗原,分析与鉴定对应抗原成分,封闭交
叉抗原,测定对应抗原成分,测定抗原纯度等。
1.液体抗血清保存原则:避免反复冻融
2.短期保存的抗血清:如几周内就会使用,收到后推荐在 2-8℃保存,2-8℃短暂保存
数周对活性没有影响。
3.保存的抗体:如抗体需超过 1 个月后才会使用,请酌情分装后于-20℃保存。