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通过加入糖进行峰蜜掺假的LC-IRMS 测定

发布时间：2009/7/6点击次数：472

化学分析：
        新近发展的LC-IRMS （液相色谱- 同位素质谱联用）分析方法是正式的AOAC （分析家协会正式分析方法）中编号为NO.998.12（蜂蜜中C-4 植物糖含量的测定，1999）分析方法的进一步发展，经过几年的研究，APPLICA 公司成功地完善了AOAC 方法中峰蜜中组份的常规检测，并将其制定为国际认证标准方法（ISO 17025）。尽管如此，某些种类的添加糖（如甜菜中C-3 糖的测定）不能被检测，因此分析方法的完善显得迫在眉睫，在用户需求的推动下，APPLICA 公司于2005 年开始这项研究项目，并最终发展了LC-IRMS 这一分析技术。这一技术弥补了AOAC 方法中蜂蜜各组份如果糖、葡萄糖、二糖、三糖等13C/12C 同位素比值（d13C）测定，LC-IRMS 这一革新在线联用新分析方法可检测AOAC 方法无法检测的各种糖。
       分析结果的解释是建立在AOAC 分析方法及各种糖组份同位素组成的基础之上，各种糖组份同位素的含量测定与AOAC 方法一致，表1 列出的是纯蜂蜜中糖组份同位素含量及其变化范围。

表1：纯峰蜜中糖组份 d ¹³C（ LC-IRMS）测定值（测定值是通过VPDB进行校正的）

序号	测定项目	测定值（纯峰蜜）	参考文献
1	蛋白质中d ¹³C值（P）	-27.5～-25.5‰	White & Doner ^a,b
2	峰蜜中d ¹³C值（H）	-27.5～-25.5‰	White & Doner ^a,b
3	蛋白质与峰蜜中d ¹³C Delta差值（P-H）	小于-1‰	White & Doner ^a,b
4	C-4糖含量（计算）	小于7% （文献值）	White & Winters^c AOAC 998.12^d
5	果糖中d ¹³C值 -与葡萄糖中d ¹³C差值 -与二糖中d ¹³C差值 -与三糖中d ¹³C差值 -与蛋白质中d ¹³C差值	-27.5～-25.5‰ -1～+1‰ -2～+2‰ -2～+2‰ -2～+2‰	摘自no.2 APPLICA,Cabanero et al.^e APPLICA,Cabanero et al.e APPLICA APPLICA
6	葡萄糖中d ¹³C值 -与果糖中d ¹³C差值 -与二糖中d ¹³C差值 -与三糖中d ¹³C差值 -与蛋白质中d ¹³C差值	-27.5～-25.5‰ -1～+1‰ -2～+2‰ -2～+2‰ -2～+2‰	摘自no.2 APPLICA,Cabanero et al.e APPLICA,Cabanero et al.e APPLICA APPLICA
7	二糖中d ¹³C值 -与果糖中d ¹³C差值 -与葡萄糖中d ¹³C差值 -与三糖中d ¹³C差值 -与蛋白质中d ¹³C差值	-27.5～-25.5‰ -2～+2‰ -2～+2‰ -2～+2‰ -2～+2‰	摘自no.2 APPLICA,Cabanero et al.e APPLICA,Cabanero et al.e APPLICA APPLICA
8	三糖中d ¹³C值 -与果糖中d ¹³C差值 -与葡萄糖中d ¹³C差值 -与二糖中d ¹³C差值 -与蛋白质中d ¹³C差值	-27.5～-25.5‰ -2～+2‰ -2～+2‰ -2～+2‰ -2～+2‰	摘自no.2 APPLICA APPLICA APPLICA APPLICA

近期出版的刊物中，Cabanero et al.d 用同样方法测定了蜂蜜中的掺假糖，其测定条件比APPLICA 公司更为苛刻。表1 中测定值的不确定度为±0.3‰。
除d13C 同位素比值外，果糖/ 葡萄糖的比值，二糖及三糖的相对含量也可通过LC-IRMS 进行测定（见表2，第9~12 项）。当分析花蜜中的组份时，这些组份的含量显得非常有趣，它给出了潜在可能的掺假信息，文献f,e 给出了果糖/ 葡萄糖比值的参考值，二糖与三糖的含量与纯峰蜜中测定值相吻合，表2 给出了纯金合欢及花蜜中各组份的平均值及变化范围，由表可以看出，这些测定都在表1中所列数据范围之内。

表2：纯金合欢及花蜜中糖组份 d ¹³C（ LC-IRMS）测定值（测定值是通过VPDB进行校正的）

序号	测定项目	纯金合欢（n=60）		纯花粉及蜜汁（n=196）
		平均值	范围（最小值/最大值）	平均值	范围（最小值/最大值）
1	蛋白质中d ¹³C值	-24.7‰	-25.5/-23.7‰	-25.4‰	-26.7/-22.7‰
2	峰蜜中d ¹³C值	-25.1‰	-25.6/-24.1‰	-25.7‰	-27.3/23.0‰
3	蛋白质与峰蜜中Delta d ¹³C 差值	0.4%	-0.3/0.9‰	0.3‰	-0.9/1.5‰
4	C-4糖含量	0.1‰	0/1.9‰	0.3‰	0/5.7‰
5	果糖中d ¹³C值 -与葡萄糖中d ¹³C差值 -与二糖中d ¹³C差值 -与三糖中d ¹³C差值 -与蛋白质中d ¹³C差值	-25.1‰ -0.1‰ 0.2‰ -1.0‰ -0.4‰	-25.6/-23.9‰ -0.8/1.2‰ -1.0/1.5‰ -2.0/0.3‰ -1.1/0.7‰	-25.8‰ -0.1‰ 0.2‰ -0.7‰ -0.3‰	-27.5/-23.2‰ -0.8/1.1‰ 1.6/2.0‰ -2.0/1.1‰ -1.5/1.2‰
6	葡萄糖中d ¹³C值 -与果糖中d ¹³C差值 -与二糖中d ¹³C差值 -与三糖中d ¹³C差值 -与蛋白质中d ¹³C差值	-25.1‰ 0.1‰ 0.3‰ -1‰ -0.3‰	-25.8/-23.9‰ -1.2/0.8‰ -0.8/1.8‰ -1.8/0.4‰ -0.8/0.2‰	-25.7‰ 0.1‰ 0.3‰ -0.6‰ -0.3‰	-27.2/-22.7‰ -1.1/0.8‰ -1.8/2.0‰ -2.0/2.0‰ -2.0/1.7‰
7	二糖中d ¹³C值 -与果糖中d ¹³C差值 -与葡萄糖中d ¹³C差值 -与三糖中d ¹³C差值 -与蛋白质中d ¹³C差值	-25.3 -0.2‰ -0.3‰ -1.2‰ -0.6‰	-26.7/-23.9‰ -1.5/1.0‰ -1.8/0.8‰ -2.0/0.3‰ -1.9/0.5‰	-26.0‰ -0.2‰ -0.3‰ -0.9‰ -0.6‰	-27.5/-22.5‰ -2.0/1.6‰ -2.0/1.8‰ -2.0/2.0‰ -2.0/1.7‰
8	三糖中d ¹³C值 -与果糖中d ¹³C差值 -与葡萄糖中d ¹³C差值 -与二糖中d ¹³C差值 -与蛋白质中d ¹³C差值	-24.1‰ 1.0‰ 1.0‰ 1.2‰ 0.6‰	-25.3/-22.9‰ -0.3/2.0‰ -0.4/1.8‰ 0.3/2.0‰ -0.5/2.0‰	-25.1‰ 0.7‰ 0.6‰ 0.9‰ 0.4‰	-27.1/-22.6‰ -1.0/2.0‰ -1.1/2.0‰ -2.0/2.0‰ -1.2/1.2‰
9	果糖/葡萄糖比值	1.61	1.50/1.82	1.20	1.00/1.46
10	二糖相对含量（％）	8.9	5.2/13.7	6.1	1.2/14.0
11	三糖相对含量（％）	2.6	1.1/5.5	1.0	0/8.0

说明：

表中数据是通过已有的知识获得的，其可靠性有待认证，仅供参考。

备注：

d ¹³C: 表示待测样品对标准样品¹³C/¹²C同位素比值的千分差

相关产品：
DELTA V 同位素质谱仪
MAT253 气体同位素质谱仪

文献来源：
[a] J.Apic.Res.17（1978）94-99,

[b] J.Ass.Off.Anal.Chem.61（1978）746-750,

[c] J.Ass.Off.Anal.Chem.72（1989）907-911,

[d] AOAC Official Mothods of Analysis（19999）,Chapter 44,27-30,

[e] J.Agr.Food Chem.54（2006）9719-9727,

[f] Apidologie 35（2004）38-81,

[g]Swiss Food Manual （2004）,Chapter 23A,Table 23A.7

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